歯周病原性細菌線毛の遺伝子型と歯周炎患者のIgGサブクラス抗体の特異性

• Project/Area Number: 16791336
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Social dentistry
• Research Institution: Kagoshima University
• Principal Investigator: 鉛山 ゆかり 鹿児島大学, 医学部・歯学部附属病院, 助手 (90325811)
• Project Period (FY): 2004 – 2005
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2005)
• Budget Amount: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000); Fiscal Year 2005: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000); Fiscal Year 2004: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
• Keywords: 歯周病 / Porphyromonas gingivalis / 線毛 / スクリーニング検査 / 末梢血 / 抗体 / IgG / IgGサブクラス

Research Abstract

歯周炎のスクリーニング検査としての歯周病原性細菌に対する血中抗体価の測定の意義を証明し、将来の血液を利用した高精度の歯周炎スクリーニング検査の開発基盤を確立することを目的に研究を行ってきた。歯周病の原因菌としてはPorphyromonas gingivalisが最も注目されており、その病原性を決定する因子として線毛がある。P.gingivalis線毛には5種類の遺伝子型が存在することが最近になって明らかにされた。われわれは、I〜V型線毛を発現するP.gingivalis菌株(I型:ATCC33277、II型:HW24D-1、III型:6/26、IV型:HG564、V型:HNA-99)を入手した。これらのプラスミドを大腸菌BL21に組み込み、リコンビナントP.gingivalis線毛を抽出、精製した。これらの各遺伝子型線毛をELISA用プレートに固相化し、段階希釈を行った被験血清(平成10年度に鹿児島県東町で行った検診受診者の保存血清)を反応させた後、2次抗体(酵素標識抗ヒトIgG抗体)を添加し、発色反応の後、各ウェルの吸光度を測定した。この際、同時に測定したヒトIgG抗体と比較した相対値として各人の血中のP.gingivalis線毛特異的IgG抗体価を算出した。
歯周病の重症度によって被験者を3群に分け、各遺伝子型線毛に対する抗体価との関連性を検討した。すべての群において、III型線毛に対する抗体価の平均が高く、V型線毛に対する抗体価の平均が低い値を示した。V型線毛に対する平均の抗体価については歯周病重症度による有意差は認められなかったが、I〜IV型線毛に対する平均の抗体価については各遺伝子型によって程度の差はあるものの、歯周病重症度との関連性が認められた。今後はこの結果をもとに歯周炎のスクリーニング検査への応用について検討していく予定である。