5-ALAを用いた光線力学的手法に基づくヒトiPS細胞の腫瘍化防止技術の確立

• Project/Area Number: 16H07467
• Research Category: Grant-in-Aid for Research Activity Start-up
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: General surgery
• Research Institution: National Center for Child Health and Development
• Principal Investigator: 蔡 松潔 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 移植免疫研究室, リサーチアソシエイト (90782409)
• Project Period (FY): 2016-08-26 – 2018-03-31
• Project Status: Declined (Fiscal Year 2017)
• Budget Amount: ¥2,730,000 (Direct Cost: ¥2,100,000、Indirect Cost: ¥630,000); Fiscal Year 2017: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2016: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
• Keywords: iPSC / 5-ALA / PpIX / 細胞・組織 / 免疫学

Outline of Annual Research Achievements

本研究の目的は、ヒトiPS細胞(hiPSc)とhiPSc由来分化細胞との間のProtoporphyrin IX (PpIX)蓄積能力の違いを利用した両者の識別、さらには未分化iPS細胞の特異的な除去方法の開発にある。
5-ALAの蓄積には、細胞内やミトコンドリア内への取り込み／5-ALAからPpIXへの代謝の各ステップ／ミトコンドリア内や細胞内からの排出のそれぞれが関与し、三者のバランスによって決定される。
5-ALAを1mM／4時間取り込ませた直後のPpIX蓄積量を、hiPSc／hiPS-MC／hiPSc由来樹状細胞（hiPS-DC）／hPBMCとで比較したところ、hiPSc > hiPS-MC > hiPS-DC > ヒト単球 > ヒトリンパ球であった。未分化iPS細胞は、その他の細胞よりも高いPpIX蓄積能力を示した。
上記機序の検討の為に、未分化hiPSc、分化後hiPSc (D-hiPSc)とヒト末梢血単核球細胞(PBMC)について、5-ALA・PpIX代謝・輸送関連因子の遺伝子発現解析を行った。hiPScのmRNAは、PEPT1、D-hiPSc:1.7倍、PBMC:2.2倍；(a)HMBS 、D-hiPSc:3.9倍、PBMC:3.5倍；(b)UROD、D-hiPSc:2.3倍、PBMC:1.5倍；(c)PPOX、D-hiPSc:2.0倍、PBMC:1.8倍；FECH、D-hiPSc:3.0倍、PBMC:2.9倍；(1)鉄イオン代謝酵素frataxin、D-hiPSc:4.9倍(P<0.05)、PBMC:4. 4倍(P<0.05)；(2)鉄イオン輸送タンパク質①mitoferrin1、D-hiPSc:3.0倍、PBMC3.0倍； ②mitoferrin 2、D-hiPSc:2.9倍、PBMC:1.7倍の発現比を示した。

Research Progress Status

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

翌年度、交付申請を辞退するため、記入しない。