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特異的糖鎖分解酵素を用いた植物プロテオグリカンの情報伝達機構の解明

Research Project

Project/Area Number 16J05924
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Plant molecular biology/Plant physiology
Research InstitutionSaitama University

Principal Investigator

吉見 圭永  埼玉大学, 理工学研究科, 特別研究員(DC2)

Project Period (FY) 2016-04-22 – 2018-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2017)
Budget Amount *help
¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Fiscal Year 2017: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2016: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Keywords植物細胞壁 / 細胞壁多糖 / アラビノガラクタン-プロテイン / エキソ-β-1,3-ガラクタナーゼ / シロイヌナズナ / デキサメタゾン誘導発現系 / セルロース
Outline of Annual Research Achievements

アラビノガラクタン-プロテイン(AGP)は植物界に普遍的に存在する細胞外プロテオグリカンであり、様々な生理現象に関与している。AGPは複雑な糖鎖構造を持つため、糖鎖の分子機能は未だに不明な点が多く残されている。本研究では、微生物由来の特異的かつ強力なAG糖鎖分解酵素、エキソ-β-1,3-ガラクタナーゼ(Il3GAL)を利用し、AG糖鎖の機能阻害が可能な植物の作出し、AG糖鎖の分子機能の解明を目指している。
平成28年度は、デキサメタゾン(DEX)によりIl3GALが発現し、AG糖鎖の分解を誘導するシロイヌナズナ、DEX::Il3GAL植物に加えて、Il3GALの活性部位に点突然変異を入れたDEX::Il3GAL-PM植物を作出した。これらの植物においてDEX処理におけるAG糖鎖分解活性の上昇やAG糖鎖の分解を確認した。さらにDEX::Il3GAL植物をDEX処理するとセルロース量が顕著に減少することを見出した。平成29年度は、AG糖鎖の分解により起こる表現型を走査型電子顕微鏡で観察を行った。DEX処理したDEX::Il3GAL植物の詳細な観察により、表皮細胞だけでなく様々な細胞で著しい細胞肥大が観察された。このような部分的な細胞肥大は、野生型植物やDEX::Il3GAL-PM植物では起こらなかった。細胞肥大はセルロースの合成が異常となり、細胞壁の強度が弱くなったためと考えられる。セルロースは表層微小管に沿って合成されるため、表層微小管を可視化し、経時的に観察を行った。DEX::Il3GAL植物をDEX処理すると48時間後から細胞が肥大しはじめ、表層微小管の密度や配向が変化していた。
本研究は、真菌由来の分解酵素を利用し、AG糖鎖の分解を誘導する新規アプローチを確立し、AGPが直接または表層微小管の変化を介してセルロースの合成量に影響していること明らかにした。

Research Progress Status

29年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

29年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(2 results)
  • 2017 Annual Research Report
  • 2016 Annual Research Report
  • Research Products

    (9 results)

All 2017 2016

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 1 results) Presentation (5 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results) Funded Workshop (1 results)

  • [Journal Article] Heterologous expression and characterization of an Arabidopsis β-l-arabinopyranosidase and α-d-galactosidases acting on β-l-arabinopyranosyl residues2017

    • Author(s)
      Imaizumi Chiemi、Tomatsu Harumi、Kitazawa Kiminari、Yoshimi Yoshihisa、Shibano Seiji、Kikuchi Kaoru、Yamaguchi Masatoshi、Kaneko Satoshi、Tsumuraya Yoichi、Kotake Toshihisa
    • Journal Title

      Journal of Experimental Botany

      Volume: 68 Issue: 16 Pages: 4651-4661

    • DOI

      10.1093/jxb/erx279

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Properties of two fungal endo-β-1,3-galactanases and their synergistic action with an exo-β-1,3-galactanase in degrading arabinogalactan-proteins2017

    • Author(s)
      Yoshimi Yoshihisa、Yaguchi Kaori、Kaneko Satoshi、Tsumuraya Yoichi、Kotake Toshihisa
    • Journal Title

      Carbohydrate Research

      Volume: 453-454 Pages: 26-35

    • DOI

      10.1016/j.carres.2017.10.013

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A protease/peptidase from culture medium of Flammulina velutipes that acts on arabinogalactan-protein2017

    • Author(s)
      Yoshimi, Y., Sugawara, Y., Hori, C., Igarashi, K., Kaneko, S., Tsumuraya, Y., and Kotake, T.
    • Journal Title

      Biosci. Biotechnol. Biochem.

      Volume: 81 Issue: 3 Pages: 475-481

    • DOI

      10.1080/09168451.2016.1258985

    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] 特異的分解酵素の発現によるAGP糖鎖の機能阻害2017

    • Author(s)
      吉見圭永、吉村真美、八鍬頼誠、芝野誠二、出崎能丈、澁谷直人、円谷陽一、小竹敬久
    • Organizer
      第58回日本植物生理学会年会
    • Place of Presentation
      鹿児大学(鹿児島県、鹿児島市)
    • Year and Date
      2017-03-16
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
  • [Presentation] In vivo degradation of type-II arbinogalactan using fungal exo-b-1,3-galactanase in plant.2017

    • Author(s)
      Yoshihisa Yoshimi, Mami Yoshimura, Raijoh Yakuwa, Seiji Shibano, Yoichi Tsumuraya, Toshihisa Kotake
    • Organizer
      6th International conference on Plant Cell Wall Biology
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 真菌由来エキソ-β-1,3-ガラクタナーゼの発現による植物のII型アラビノガラクタンの分解2017

    • Author(s)
      吉見圭永、吉村真美、八鍬頼誠、芝野誠二、円谷陽一、小竹敬久
    • Organizer
      日本植物学会第81回大会
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] 特異的なガラクタナーゼの誘導発現系を利用したAGPの生理機能の解析2016

    • Author(s)
      吉見圭永、吉村真美、八鍬頼誠、芝野誠二、出崎能丈、澁谷直人、円谷陽一、小竹敬久
    • Organizer
      日本植物学会第80回大会
    • Place of Presentation
      沖縄コンベンションセンター(沖縄県、宜野湾市)
    • Year and Date
      2016-09-16
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
  • [Presentation] In vivo degradation of sugar chains of arabinogalactan-proteins by microbial glycoside hydrolases in Arabidopsis.2016

    • Author(s)
      Yoshihisa Yoshimi, Mami Yoshimura, Raijoh Yakuwa, Seiji Shibano, Yoshitake Desaki, Naoto Shibuya, Yoichi Tsumuraya, Toshihisa Kotake
    • Organizer
      XIV Cell Wall Meeting
    • Place of Presentation
      ギリシャ、クレタ島、ハニア
    • Year and Date
      2016-06-12
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Funded Workshop] 6th International Conference on Plant Cell Wall Biology2017

    • Related Report
      2017 Annual Research Report

URL: 

Published: 2016-05-17   Modified: 2024-03-26  

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