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膜タンパク質に基づいた貪食能を有するクルマエビ血球細胞の新規分類方法の開発

Research Project

Project/Area Number 16J08185
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Aquatic life science
Research InstitutionTokyo University of Marine Science and Technology

Principal Investigator

小祝 敬一郎  東京海洋大学, 海洋科学技術研究科, 特別研究員(DC1)

Project Period (FY) 2016-04-22 – 2019-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2018)
Budget Amount *help
¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Fiscal Year 2018: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2017: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2016: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Keywordsクルマエビ / レクチン / 血球細胞 / 網羅的遺伝子転写産物解析 / 貪食 / MACS / 貪食細胞 / マーカー分子 / アプタマー / RNA-seq / 次世代シークエンサー / 生体防御
Outline of Annual Research Achievements

本年度は,血球細胞を糖鎖に基づき分類するため,レクチンの血球細胞に対する反応性をフローサイトメーターおよび蛍光顕微鏡観察により確認した. その結果,クルマエビの血球細胞には,LEL および WGA が特徴的な染色性を示した.LEL は細胞表面に強い結合性を示す一方,WGA は細胞内の顆粒に強い結合を示すことが蛍光顕微鏡下で観察された.
次に,ビオチン標識された LEL およびストレプトアビジン標識マイクロビーズを用いた細胞磁気標識法により, 2 つの血球細胞亜集団の分離に成功した . これら細胞集団は形態学的特徴およびその遺伝子転写産物の蓄積パターンから,既報の無顆粒球および顆粒球の 2 種 類の集団であることが示唆された.
その後,MACSシステムを用いた細胞亜集団の分離後,次世代シークエンサーにより各細胞亜集団の遺伝子転写産物を網羅的に解析した.LEL強陽性血球細胞では,トランスグルタミナーゼ関連遺伝子転写産物の蓄積が多かった.LEL弱陽性血球細胞では,抗菌ペプチドおよびクロッティング関連遺伝子転写産物の蓄積が多かった .
また,in vitro でビーズの貪食を行わせた血球細胞をレクチン染色に供したところ,ビーズ貪食細胞に対して WGA が 100%の陽性率を示したことから,クルマエビにおいて顆粒球が貪食作用を主に担っていることが示唆された.

Research Progress Status

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(3 results)
  • 2018 Annual Research Report
  • 2017 Annual Research Report
  • 2016 Annual Research Report
  • Research Products

    (11 results)

All 2019 2018 2017

All Journal Article (2 results) (of which Int'l Joint Research: 2 results,  Peer Reviewed: 2 results) Presentation (9 results) (of which Int'l Joint Research: 4 results)

  • [Journal Article] The immune functions of sessile hemocytes in three organs of kuruma shrimp Marsupenaeus japonicus differ from those of circulating hemocytes2018

    • Author(s)
      Koiwai Keiichiro、Kondo Hidehiro、Hirono Ikuo
    • Journal Title

      Fish & Shellfish Immunology

      Volume: 78 Pages: 109-113

    • DOI

      10.1016/j.fsi.2018.04.036

    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] RNA-seq identifies integrin alpha of kuruma shrimp Marsupenaeus japonicus as a candidate molecular marker for phagocytic hemocytes2018

    • Author(s)
      Koiwai Keiichiro、Kondo Hidehiro、Hirono Ikuo
    • Journal Title

      Developmental & Comparative Immunology

      Volume: 81 Pages: 271-278

    • DOI

      10.1016/j.dci.2017.12.014

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Presentation] レクチンを利用したクルマエビ血球細胞亜集団の 分離および網羅的遺伝子転写産物解析2019

    • Author(s)
      小祝敬一郎,近藤秀裕,廣野育生
    • Organizer
      平成31年度日本水産学会春季大会
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] The functional characterization of sessile and circulating hemocytes in kuruma shrimp Marsupenaeus japonicus2018

    • Author(s)
      Koiwai Keiichiro、Kondo Hidehiro、Hirono Ikuo
    • Organizer
      The 14th Congress of the International Society for Developmental and Comparative Immunology
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] クルマエビ組織中血球細胞の濃縮および網羅的発現遺伝子解析2018

    • Author(s)
      小祝敬一郎,近藤秀裕,廣野育生
    • Organizer
      平成30年度日本水産学会春季大会
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] 貪食能を有するクルマエビ血球細胞の分離および網羅的発現遺伝子解析2017

    • Author(s)
      小祝敬一郎・近藤秀裕・廣野育生
    • Organizer
      平成 29 年度日本水産学会春季大会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2017-03-26
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
  • [Presentation] クルマエビの貪食細胞はインテグリンα鎖に基づき2種類の集団に分類される2017

    • Author(s)
      小祝敬一郎,近藤秀裕,廣野育生
    • Organizer
      2017年度生命科学系学会合同年次大会(ConBio2017)
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] クルマエビインテグリンα鎖のマーカー遺伝子としての可能性2017

    • Author(s)
      小祝敬一郎,近藤秀裕,廣野育生
    • Organizer
      第19回マリンバイオテクノロジー学会大会
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] Candidate markers for phagocytic hemocytes of kuruma shrimp Marsupenaeus japonicus indentified by transcriptome analysis2017

    • Author(s)
      Koiwai Keiichiro、Kondo Hidehiro、Hirono Ikuo
    • Organizer
      Asia-Pacific Marine Biotechnology Conference
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Evaluation of the potential of integrin alpha subunit as a marker for hemocytes in kuruma shrimp Marsupenaeus japonicus2017

    • Author(s)
      Koiwai Keiichiro、Kondo Hidehiro、Hirono Ikuo
    • Organizer
      10th Symposium on Diseases in Asia Aquaculture
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Classification of hemocytes of kuruma shrimp by membrane protein as a marker2017

    • Author(s)
      Koiwai Keiichiro、Kondo Hidehiro、Hirono Ikuo
    • Organizer
      International Symposium Fisheries Science for Future Generations
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research

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Published: 2016-05-17   Modified: 2024-03-26  

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