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マイクロドロップレットを用いた単一微生物からの生合成遺伝子クラスターの超並列解析

Research Project

Project/Area Number 16J10443
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Biofunction/Bioprocess
Research InstitutionWaseda University

Principal Investigator

西川 洋平  早稲田大学, 理工学術院, 特別研究員(DC1)

Project Period (FY) 2016-04-22 – 2019-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2018)
Budget Amount *help
¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Fiscal Year 2018: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2017: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2016: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Keywordsシングルセルゲノミクス / 全ゲノム増幅 / マイクロ流体デバイス
Outline of Annual Research Achievements

環境中の微生物は99%以上が難培養性であり、生物界におけるダークマターと例えられる。難培養微生物が有する遺伝子の詳細な解析には、単一細胞レベルでのゲノム解析が有効であるが、従来までの手法では多様な細胞集団に適用可能なスクリーニング量が得られていなかった。そこで本研究では、環境中の微生物がもつ全ゲノムの情報を単一細胞レベルで網羅的に解析し、標的となる細胞の高精度な単一細胞ゲノム情報を取得可能な技術の開発を目指した。
本年度は、これまでに開発した微小液滴を用いた全ゲノム増幅技術と標的遺伝子の検出機構を組み合わせることにより、網羅的に増幅した単一細胞由来のゲノム情報の中から標的となる遺伝子配列を含んだサンプルのみを効率的に検出する技術を開発した。本技術の応用例としてサンゴ組織内に共在する微生物のゲノム解析を実施し、環境中の存在比が非常に少ない微生物に対しても高精度なゲノム解析が可能であることを実証した。また細胞溶菌手法の改良によって、これまで解析が困難であった難溶解性の微生物に対しても効果的なゲノム解析を可能とした。これにより、海水、海泥、土壌、腸内細菌などを含む多種多様な環境サンプルを対象とした単一細胞ゲノム解析が可能となり、合計1000個以上のSingle amplified genomes (SAGs)の獲得に成功した。
本研究を通して、環境微生物の単一細胞解析に向けた高精度かつハイスループットなゲノム増幅法が確立された。

Research Progress Status

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

平成30年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(3 results)
  • 2018 Annual Research Report
  • 2017 Annual Research Report
  • 2016 Annual Research Report
  • Research Products

    (19 results)

All 2019 2018 2017 2016

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results,  Open Access: 1 results) Presentation (12 results) (of which Int'l Joint Research: 5 results,  Invited: 1 results) Book (4 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] Obtaining high-quality draft genomes from uncultured microbes by cleaning and co-assembly of single-cell amplified genomes2018

    • Author(s)
      Kogawa Masato、Hosokawa Masahito、Nishikawa Yohei、Mori Kazuki、Takeyama Haruko
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 8 Issue: 1

    • DOI

      10.1038/s41598-018-20384-3

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Altmetric: 2Citations: 1More detail Article | OPEN Massively parallel whole genome amplification for single-cell sequencing using droplet microfluidics2017

    • Author(s)
      Hosokawa M., Nishikawa Y., Kogawa M., Takeyama H.
    • Journal Title

      Scientific Reports

      Volume: 7:5199 Issue: 1

    • DOI

      10.1038/s41598-017-05436-4

    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] Droplet microfluidics for high throughput and accurate single-cell genome sequencing of coral commensal bacteria2019

    • Author(s)
      Yohei Nishikawa, Masahito Hosokawa, Masato Kogawa, Haruko Takeyama
    • Organizer
      12th International workshop on approaches to single cell analysis
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Development of droplet microfluidics for single-cell genomics of coral associated bacteria2019

    • Author(s)
      Yohei Nishikawa, Masahito Hosokawa, Masato Kogawa, Haruko Takeyama
    • Organizer
      5th Core-to-Core International Symposium
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] サンゴ共在微生物の単一細胞ゲノム解析に向けた微小液滴作成技術の応用2018

    • Author(s)
      西川洋平
    • Organizer
      第20回マリンバイオテクノロジー学会
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] Microfluidic droplet-based whole genome amplification toward bacteria single-cell genomics2018

    • Author(s)
      Yohei Nishikawa, Masahito Hosokawa, Masato Kogawa, Haruko Takeyama
    • Organizer
      ADVANCED TECHNIQUES TO STUDY AND EXPLOIT THE SPONGE AND CORAL MICROBIOMES WORKSHOP
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] Droplet microfluidics toward accurate genome sequencing of environmental bacteria at the single-cell level2018

    • Author(s)
      NISHIKAWA Yohei, HOSOKAWA Masahito, KOGAWA Masato, TAKAHASHI Kai, TAKEYAMA Haruko
    • Organizer
      日本化学会第98春季年会
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] 微小液滴を用いた単一細胞からの超並列ゲノム解析技術の開発2017

    • Author(s)
      西川 洋平, 細川 正人, 小川 雅人, 竹山 春子
    • Organizer
      第69回日本生物工学会大会
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] マイクロドロップレットを用いた高精度な超並列1細胞ゲノム解析技術の開発2017

    • Author(s)
      西川 洋平, 細川 正人, 小川 雅人, 竹山 春子
    • Organizer
      第11回バイオ関連化学シンポジウム
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] マイクロ流体デバイスによる高精度な超並列1細胞ゲノム増幅技術の開発2017

    • Author(s)
      西川 洋平, 細川 正人, 小川 雅人, 竹山 春子
    • Organizer
      NGS現場の会第5回研究会
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] ピコリットル容量の微小液滴を用いた単一微生物からの網羅的な全ゲノム増幅2016

    • Author(s)
      西川洋平、細川正人、小川雅人、竹山春子
    • Organizer
      第68回日本生物工学会大会
    • Place of Presentation
      富山国際会議場(富山県富山市)
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
  • [Presentation] 単一微生物からの高精度な全ゲノム解析に向けたマイクロ流体デバイスの活用2016

    • Author(s)
      西川洋平
    • Organizer
      日本生物工学会東日本支部第11回学生発表討論会
    • Place of Presentation
      大学セミナーハウス(東京都八王子市)
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] Picoliter-sized droplets for low-bias and contamination-free reactions in whole genome amplification of single bacterial cells2016

    • Author(s)
      Yohei Nishikawa, Masahito Hosokawa, Masato Kogawa, Haruko Takeyama
    • Organizer
      Biosensors 2016
    • Place of Presentation
      Gothia towers hotel(ヨーテボリ, スウェーデン)
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] droplet microfluidics for massively parallel and accurate genome amplification of single cells2016

    • Author(s)
      Yohei Nishikawa, Masahito Hosokawa, Masato Kogawa, Haruko Takeyama
    • Organizer
      International conference on single cell research 2016
    • Place of Presentation
      東京大学(東京都文京区)
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Book] 生体の科学68巻2号: 難培養微生物を対象としたシングルセルゲノミクスの課題と展望2018

    • Author(s)
      細川 正人, 西川 洋平, 竹山 春子
    • Total Pages
      186
    • Publisher
      医学書院
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Book] 月刊バイオインダストリー 2017年6月号: 微生物のシングルセルゲノム解析に向けた技術基盤2017

    • Author(s)
      細川 正人, 丸山 徹, 西川 洋平, 竹山 春子
    • Total Pages
      64
    • Publisher
      シーエムシー出版
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Book] シングルセル解析プロトコール: 微生物のシングルセルゲノム解析2017

    • Author(s)
      細川正人, 丸山徹, 西川洋平, 竹山春子
    • Total Pages
      345
    • Publisher
      羊土社
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Book] ドロップレット・マイクロフルイディクスによる超並列シングルセル解析2016

    • Author(s)
      細川正人、西川洋平、竹山春子
    • Total Pages
      182
    • Publisher
      化学センサ研究会
    • Related Report
      2016 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] ゲノムライブラリーの作製方法及びゲノムライブラリーの作製装置2018

    • Inventor(s)
      細川正人、竹山春子、西川洋平、小川雅人
    • Industrial Property Rights Holder
      細川正人、竹山春子、西川洋平、小川雅人
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Filing Date
      2018
    • Related Report
      2018 Annual Research Report

URL: 

Published: 2016-05-17   Modified: 2024-03-26  

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