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Improvement of in vitro maturation of bovine oocytes for clinical application

Research Project

Project/Area Number 16K08059
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Research Field Veterinary medical science
Research InstitutionOsaka Prefecture University

Principal Investigator

Tamada Hiromichi  大阪府立大学, 生命環境科学研究科, 教授 (10155252)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 稲葉 俊夫  大阪府立大学, 生命環境科学研究科, 客員教授 (00137241)
川手 憲俊  大阪府立大学, 生命環境科学研究科, 教授 (80221901)
Research Collaborator Sakagami Nobutada  
Project Period (FY) 2016-04-01 – 2019-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2018)
Budget Amount *help
¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000)
Fiscal Year 2018: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2017: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2016: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Keywords卵子 / 成熟培養 / ウシ / 経腟採卵 / 胚盤胞 / OPU / MAPK / 酸化還元 / 獣医学
Outline of Final Research Achievements

This study clarified that ① treatment with the MAPK kinase inhibitor U0126 (5 μM) during the first two hours of in vitro maturation on the cumulus-oocyte complexes (COCs) collected from bovine ovaries obtained at a slaughterhouse improves oocyte developmental competence and increases production rates of transferable embryos after in vitro fertilization and in vitro culture, ② the treatment with U0126 delays breakdown of the GAP junctions between oocytes and cumulus cells and increases the influx of an anti-oxidant glutathione from cumulus cells to oocytes via GAP junctions, ③ the treatment with U0126 on COCs derived from the ovum pick up method efficiently develop transferable embryos, and normal calves develop by transferring these embryos to recipient cows.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

ウシ卵子を成熟培養して体外受精後に発生培養を実施する場合、胚盤胞の発生率が低いことが従来から問題となっていた。成熟培養法の改良により胚盤胞発生率が高くなることが示唆されてきたが、遺伝的に優良な雌ウシから卵子を採取して後継牛を得ることができる経腟採卵法を用いた臨床的に実用性のある方法は知られていない。本研究では、従来実施されている成熟培養の最初の2時間にU0126を培養液に添加することで、その後の胚盤胞発生率が著しく改善されることを明らかにし、得られた胚盤胞から正常な産子も得られることを示した。
本法を臨床応用することにより、優良牛から得た卵子を用いて効率的に後継牛が得られることが期待される。

Report

(4 results)
  • 2018 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2017 Research-status Report
  • 2016 Research-status Report
  • Research Products

    (7 results)

All 2019 2018 2017 2016

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 2 results,  Open Access: 2 results) Presentation (5 results) (of which Invited: 1 results)

  • [Journal Article] Production of Japanese Black calves by the transfer of embryos developed from <i>in vitro-</i>fertilized oocytes derived by ovum pick up and matured in culture with the mitogen-activated protein kinase kinase inhibitor U01262019

    • Author(s)
      Sakagami N, Konda K, Hashimura S, Kawate N, Inaba T, Tamada H.
    • Journal Title

      Journal of Veterinary Medical Science

      Volume: 81 Issue: 3 Pages: 379-382

    • DOI

      10.1292/jvms.18-0460

    • NAID

      130007612681

    • ISSN
      0916-7250, 1347-7439
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Treatment with the MAPK kinase inhibitor U0126 during the first two hours of in vitro maturation improves bovine oocyte developmental competence.2017

    • Author(s)
      T. Shinohara, Y. Ohta, N. Kawate, M. Takahashi, N. Sakagami, T. Inaba, H. Tamada.
    • Journal Title

      Reprod Domest Anim.

      Volume: 53 Issue: 1 Pages: 270-273

    • DOI

      10.1111/rda.13096

    • Related Report
      2017 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] ウシ卵子成熟培養初期のMAPKK阻害剤添加による卵子におけるグルタチオンの増加と活性酸素種の減少2019

    • Author(s)
      青山桃子、坂上信忠、川手憲俊、玉田尋通
    • Organizer
      平成30年度日本獣医師会獣医学術学会年次大会
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Invited
  • [Presentation] ウシ卵子の体外成熟培養時におけるMAPKK阻害剤(U0126)添加が卵子胚発生能関連因子の遺伝子発現に及ぼす影響2018

    • Author(s)
      青山桃子、坂上信忠、川手憲俊、玉田尋通
    • Organizer
      平成30年度獣医学術近畿地区学会
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] ウシ卵子の体外成熟培養時におけるMAPKK阻害剤(U0126)添加が胚発生と受胎に及ぼす影響2017

    • Author(s)
      坂上信忠、山本和明、篠原健志、川手憲俊、稲葉俊夫、玉田尋通
    • Organizer
      第160回日本獣医学会学術集会
    • Related Report
      2017 Research-status Report
  • [Presentation] ホルスタイン種経腟採卵卵子の成熟培養時におけるMAPKK阻害剤(U0126)添加がその後の胚発生に及ぼす影響2017

    • Author(s)
      坂上信忠、篠原健志、山本和明、橋村慎二、川手憲俊、稲葉俊夫、玉田尋通
    • Organizer
      日本受精卵移植関連合同研究会京都大会(第24回日本胚移植研究会大会、第33回東日本家畜受精卵移植技術研究会大会)
    • Related Report
      2017 Research-status Report
  • [Presentation] ウシ卵子の体外成熟培養時におけるMAPKK阻害剤(U0126)添加の胚発生に及ぼす影響2016

    • Author(s)
      篠原健志、太田祥弘、川手憲俊、高橋正弘、坂上信忠、稲葉俊夫、玉田尋通
    • Organizer
      第159回日本獣医学会学術集会
    • Place of Presentation
      日本大学
    • Related Report
      2016 Research-status Report

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Published: 2016-04-21   Modified: 2020-03-30  

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