RHOシグナル経路制御分子群を用いた新規の膵癌分子診断法および標的治療法の開発

• Project/Area Number: 16K08684
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Section: 一般
• Research Field: Human pathology
• Research Institution: Hokkaido University
• Principal Investigator: 三橋 智子 北海道大学, 大学病院, 准教授 (60348208)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 畑中 豊 北海道大学, 大学病院, 特任准教授 (30589924)
• Project Period (FY): 2016-04-01 – 2020-03-31
• Project Status: Granted (Fiscal Year 2018)
• Budget Amount: ¥4,680,000 (Direct Cost: ¥3,600,000、Indirect Cost: ¥1,080,000); Fiscal Year 2018: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2017: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000); Fiscal Year 2016: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
• Keywords: 浸潤性膵管癌 / RHO経路 / 治療効果予測 / 病理学 / 癌 / ゲノム

Outline of Annual Research Achievements

膵癌患者の予後改善のためには，化学療法を中心とする非切除治療の治療成績の向上が鍵となっており，予後を規定する因子に対応した個別化された分子標的治療の導入およびそのコンパニオン診断法の確立が求められている．本研究は，先行研究として実施した同一患者原発巣・転移巣由来細胞株モデルからの遺伝子発現プロファイル解析により同定した複数のRHO関連タンパク（RRP）群に着目し，本年度は以下の２課題に取り組んだ．
DNAマイクロアレイ解析による超音波内視鏡下穿刺吸引法（EUS-FNA検体）により検体採取された膵癌30症例のRRP分子の遺伝子発現検討：外科切除された膵癌のFFPE検体を用いて遺伝子発現プロファイル解析を行い，解析データを得ることができ，一定の傾向が得られたものの，RNA品質が低く，発現変動レンジが小さかったため，検体の再採取および再解析の必要が生じた．そこで本年度はRNA品質の高い検体を得るため，前向きにEUS-FNA検体30症例の収集および非FFPE検体（PAX固定検体）の作製を行った．
膵癌細胞株の公共データベースを用いたRRP群遺伝子発現解析：RRP群遺伝子発現プロファイルと膵癌分子サブタイピングの関係を検証するため公共データベースに登録された21種の膵癌細胞株のARHGAPおよびARHGEFファミリーに関する遺伝子発現プロファイリングを行ったところ，階層的クラスター解析により，これら遺伝子発現により細胞株が３群に分かれ，このうちの１群にQuasimesenchymal（QM）タイプ細胞株が多く含まれることが明らかとなった．

Current Status of Research Progress

3: Progress in research has been slightly delayed.

Reason

本研究目的の達成のため，３年目にあたる平成３０年度は，RNA品質の高い検体の前向き収集およびそれを用いたDNAマイクロアレイ解析によるRRPの遺伝子発現検討を計画したが，本年度内に目標としていた30症例のEUS-FNA検体の収集および非FFPE検体（PAX固定検体）の作製は完了したものの，症例集積に時間を要したため，DNAマイクロアレイ解析の実施には至らなかった．
以上を踏まえ，今年度の研究の進捗については，解析が未完了となったことから，自己点検による評価の区分を(3)とした．

Strategy for Future Research Activity

期間延長を行った4年目にあたる平成31年度においては，前年度実施に至らなかったDNAマイクロアレイを用いた遺伝子発現プロファイル解析を行い，またこの解析で抽出された分子について，臨床病理学的検討およびin vitroでの解析も併せて実施する．

Research Products

• [Journal Article] Impact of Tumour Budding Grade in 310 Patients Who Underwent Surgical Resection for Extrahepatic Cholangiocarcinoma (2019)
  • Author(s): Ogino M, Nakanishi Y, Mitsuhashi T, Hatanaka Y, Amano T, Marukawa K, Nitta T, Ueno T, Ono M, Kuwabara S, Yamada T, Hirano S.
  • Journal Title: Histopathology Volume: 「印刷中」
  • DOI: 10.1111/his.13827
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] A Consensus Study of the Grading and Typing of Intraductal Papillary Mucinous Neoplasms of the Pancreas. (2019)
  • Author(s): Furukawa T, Fukushima N, Itoi T, Ohike N, Mitsuhashi T, Nakagohri T, Notohara K, Shimizu M, Tajiri T8, Tanaka M9, Yamaguchi H, Yanagisawa A, Sugiyama M, Okazaki K.
  • Journal Title: Pancreas Volume: 3(48) Pages: 480-487
  • DOI: 10.1097/mpa.0000000000001270
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Metastatic mixed adenoneuroendocrine carcinoma of the liver successfully resected by hepatic trisectionectomy following chemotherapy: A case report. (2019)
  • Author(s): Sato O, Tsuchikawa T, Yamada T, Sato D, Nakanishi Y, Asano T, Noji T, Yo K, Ebihara Y, Murakami S, Nakamura T, Okamura K, Shichinohe T, Mitsuhashi T, Hirano S.
  • Journal Title: Clin Case Rep. Volume: 7(3) Pages: 491-496
  • DOI: 10.1002/ccr3.1968
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Prospective, multicenter, observational study of tissue acquisition through EUS-guided fine-needle biopsy using a 25G Franseen needle. (2019)
  • Author(s): Sugiura R, Kuwatani M, Yane K, Taya Y, Ihara H, Onodera M, Eto K, Sano I, Kudo T, Mitsuhashi T, Katanuma A, Sakamoto N; Hokkaido Interventional EUS/ERCP study (HONEST) group.
  • Journal Title: Endosc Ultrasound. Volume: 「印刷中」
  • DOI: 10.4103/eus.eus_66_18
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Validation Study of Tumor Invasive Thickness for Postoperative Prognosis in 110 Patients Who Underwent Pancreatoduodenectomy for Distal Cholangiocarcinoma at a Single Institution (2019)
  • Author(s): Yang Zhao, Yoshitsugu Nakanishi , Mariko Ogino, Mitsunobu Oba, Keisuke Okamura, Takahiro Tsuchikawa, Toru Nakamura, Takehiro Noji, Toshimichi Asano, Kimitaka Tanaka, Tomoko Mitsuhashi, Chaoliu Dai, and Satoshi Hirano
  • Journal Title: American Journal of Surgical Pathology Volume: 43(5) Pages: 717-723
  • DOI: 10.1097/pas.0000000000001244
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Cytoplasmic CD133 expression correlates with histologic differentiation and is a significant prognostic factor in extrahepatic bile duct cancer and gallbladder cancer. (2018)
  • Author(s): Mizukami T, Kamachi H, Mitsuhashi T, Einama T, Hatanaka Y, Kamiyama T, Taketomi A.
  • Journal Title: Oncol Lett. Volume: 16(5) Pages: 6423-6430
  • DOI: 10.3892/ol.2018.9499
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Clinicopathological features and prognosis of advanced biliary carcinoma centered in the cystic duct. (2018)
  • Author(s): Nakanishi Y, Tsuchikawa T, Okamura K, Nakamura T, Noji T, Asano T, Tanaka K, Shichinohe T, Mitsuhashi T, Hirano S.
  • Journal Title: HPB (Oxford) Volume: 20 Pages: 28-33
  • DOI: 10.1016/j.hpb.2017.08.014
• [Journal Article] Genomic characterization of biliary tract cancers identifies driver genes and predisposing mutations (2018)
  • Author(s): Wardell CP, Fujita M, Yamada T, Simbolo M, Fassan M, Karlic R, Polak P, Kim J, Hatanaka Y, Maejima K, Lawlor RT, Nakanishi Y, Mitsuhashi T et al
  • Journal Title: J Hepatol. Volume: - Pages: 959-969
  • DOI: 10.1016/j.jhep.2018.01.009
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Journal Article] Impact of serum CA19-9 level on prognosis and prediction of lymph node metastasis in patients with intrahepatic cholangiocarcinoma. (2018)
  • Author(s): Yamada T, Nakanishi Y, Okamura K, Tsuchikawa T, Nakamura T, Noji T, Asano T, Tanaka K, Kurashima Y, Ebihara Y, Murakami S, Shichinohe T, Mitsuhashi T, Hirano S.
  • Journal Title: J Gastroenterol Hepatol. Volume: -
  • DOI: 10.1111/jgh.14124
• [Journal Article] Identification of novel serum autoantibodies against EID3 in non-functional pancreatic neuroendocrine tumors (2017)
  • Author(s): Hontani K, Tsuchikawa T, Hiwasa T, Nakamura T, Ueno T, Kushibiki T, Takahashi M, Inoko K, Takano H, Takeuchi S, Dosaka-Akita H, Kuwatani M, Sakamoto N, Hatanaka Y, Mitsuhashi T, Shimada H, Shichinohe T, Hirano S.
  • Journal Title: Oncotarget Volume: 8 Pages: 106206-106221
  • DOI: 10.18632/oncotarget.22175
  • NAID: 120006416017
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] ZEB1 expression is associated with prognosis of intrahepatic cholangiocarcinoma. (2016)
  • Author(s): Terashita K, Chuma M, Hatanaka Y, Hatanaka K, Mitsuhashi T, Yokoo H, Ohmura T, Ishizu H, Muraoka S, Nagasaka A, Tsuji T, Yamamoto Y, Kurauchi N, Shimoyama N, Toyoda H, Kumada T, Kaneoka Y, Maeda A, Ogawa K, Natsuizaka M, Kamachi H, Kakisaka T, Kamiyama T, Taketomi A, Matsuno Y, Sakamoto N
  • Journal Title: J Clin Pathol. Volume: in press Pages: 593599-593599
  • DOI: 10.1136/jclinpath-2015-203115
  • Peer Reviewed / Acknowledgement Compliant
• [Journal Article] Stromal Palladin Expression Is an Independent Prognostic Factor in Pancreatic Ductal Adenocarcinoma. (2016)
  • Author(s): Sato D, Tsuchikawa T, Mitsuhashi T, Hatanaka Y, Marukawa K, Morooka A, Nakamura T, Shichinohe T, Matsuno Y, Hirano S
  • Journal Title: PLoS One Volume: 11
  • DOI: 10.1371/journal.pone.0152523
  • NAID: 120005757988
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Journal Article] The impact of margin status determined by the one-millimeter rule on tumor recurrence and survival following pancreaticoduodenectomy for pancreatic ductal adenocarcinoma. (2016)
  • Author(s): Nitta T, Nakamura T, Mitsuhashi T, Asano T, Okamura K, Tsuchikawa T, Tamoto E, Murakami S, Noji T, Kurashima Y, Ebihara Y, Nakanishi Y, Shichinohe T, Hirano S.
  • Journal Title: Surg Today Volume: Epub ahead of print
  • NAID: 120006415997
  • Peer Reviewed
• [Presentation] 膵癌の治療選択に有用なIHC分子サブタイピング法の確立に関する検討（ワークショップ 膵胆道系腫瘍における分子病理学的知見の進歩 基礎から臨床応用まで） (2018)
  • Author(s): 三橋 智子，丸川 活司，畑中 豊，松野 吉宏
  • Organizer: 第107回日本病理学会総会
• [Presentation] 膵管癌分子サブタイピングのIHCサロゲート法の確立に関する検討 (2018)
  • Author(s): 丸川 活司，三橋 智子，畑中 豊，諸岡 亜早美，佐藤 大介，奥村 麻美，南家 綾江，畑中 佳奈子，平野 聡，松野 吉宏
  • Organizer: 第107回日本病理学会総会
• [Presentation] von Hippel-Lindau病患者に発生した多形性に富む膵神経内分泌腫瘍（pleomorphic panNET）の一例 (2018)
  • Author(s): 出口 貴祥，丸川 活司，清水 知浩，恩田 千景，後藤 久美，安孫子 光春，岡田 宏美，高桑 恵美，三橋 智子，松野 吉宏
  • Organizer: 第59回日本臨床細胞学会総会(春期大会)
• [Presentation] 神経内分泌腫瘍および充実性偽乳頭状腫瘍などの細胞診の実践 (2017)
  • Author(s): 三橋 智子
  • Organizer: 第56回日本臨床細胞学会秋期大会
• [Presentation] 膵管内乳頭粘液性腫瘍の膵液細胞診について (2016)
  • Author(s): 三橋 智子
  • Organizer: 第105回日本病理学会総会
  • Place of Presentation: 仙台国際センター(宮城県仙台市)
  • Year and Date: 2016-05-12
  • Invited
• [Presentation] 膵管癌におけるNT5E発現における臨床病理学的検討 (2016)
  • Author(s): 諸岡 亜早美，畑中 豊，丸川 活司，上野 峰，佐藤 大介，平野 裕子，奥村 麻美，清水 知浩，畑中 佳奈子，三橋 智子，松野 吉宏
  • Organizer: 第105回日本病理学会総会
  • Place of Presentation: 仙台国際センター(宮城県仙台市)
  • Year and Date: 2016-05-12
• [Presentation] 低分化肝外胆管癌における臨床病理学的因子の検討 (2016)
  • Author(s): 上野 峰，三橋 智子，畑中 豊，岡村 圭祐，平野 聡，松野 吉宏
  • Organizer: 第105回日本病理学会総会
  • Place of Presentation: 仙台国際センター(宮城県仙台市)
  • Year and Date: 2016-05-12