| Project/Area Number |
16K10059
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Research Field |
Pediatrics
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| Research Institution | The University of Tokyo |
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Principal Investigator |
Inuzuka Ryo 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (00597560)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
平田 陽一郎 東京大学, 医学部附属病院, 講師 (40447397)
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| Research Collaborator |
Nakagama Yu
Nakanishi Toshio
Takeuchi Jun
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| Project Period (FY) |
2016-04-01 – 2019-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2018)
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| Budget Amount *help |
¥4,810,000 (Direct Cost: ¥3,700,000、Indirect Cost: ¥1,110,000)
Fiscal Year 2018: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2017: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Fiscal Year 2016: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
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| Keywords | 先天性心疾患 / RAS/MAPK症候群関連心臓病 / 心臓発生 / ゼブラフィッシュ / マウス / 遺伝子改変疾患動物モデリング / RAS/MAP症候群関連心臓病 / 網羅的遺伝子解析 / 発生 / 心筋症 / 内臓錯位 / 線毛機能 / 内臓錯位症候群 / 左右軸 / 心房心室不一致 / 遺伝子改変ノックアウト変異体 / ゲノム編集 / 機能解析 |
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| Outline of Final Research Achievements |
Based on genome-wide analysis and bioinformatic analysis, LZTR1 was selected as a candidate gene for a pedigree with conotruncal anomaly and hypertrophic cardiomyopathy. We performed in-vivo functional analysis for LZTR1 based on zebra fish model using the CRISPR-Cas9 system. A chimeric F0 mutant harboring a 7bp deletion germline allele was identified and backcrossed to wild-type fish to obtain F1 heterozygotes (lztr1del/+). F1 heterozygotes were crossed to generate F2 homozygous mutants (lztr1del/del), which recapitulated hypertrophic cardiomyopathy. Further, immunohistochemical analysis using anti-phospho-ERK antibody indicated active RAS/MAPK signaling, the deleterious signature of NS-associated hypertrophic cardiomyopathy.
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
本研究では、RAS/MAPK症候群関連心臓病におけるLZTR1の重要性が明らかになった。本研究で作出された、疾患モデルゼブラフィッシュは今後RAS/MAPK症候群関連心臓病の病態生理の解明に役立つことが期待される。特に、ゼブラフィッシュから得られる単離心筋細胞は、哺乳動物のそれと異なり、中長期培養、薬剤刺激、RNA阻害実験に適しており、RAS/MAPK症候群関連心臓病の細胞レベルの病態生理を解析する上で、最適なプラットフォームを提供してくれると考えられる。
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