新規タンパク質ASCLの研究に基づいたpyrindomainの増殖抑制機構解析

• Project/Area Number: 17014082
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: Japanese Foundation For Cancer Research
• Principal Investigator: 吉川 浩英 (財)癌研究会, エピジェネシス発がん研究部, 部長 (50342655)
• Project Period (FY): 2005
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2005)
• Budget Amount: ¥5,300,000 (Direct Cost: ¥5,300,000); Fiscal Year 2005: ¥5,300,000 (Direct Cost: ¥5,300,000)
• Keywords: 蛋白質 / 癌 / pyrin domain / 細胞周期 / 増殖抑制作用

Research Abstract

本研究においては、ASCLタンパクとanaphase promoting complex (APC)の構成因子との相互作用に基づいたASCLの細胞分裂期における機能を解析している。まず、ASCLとAPC構成因子は顕微鏡下でspeck状にcolocalizeすることが観察された。pull down assayによる相互作用の検索を行った所、reticulocyte lysateを用いた通常の条件下では結合が認められなかった。APCがユビキチンライゲース複合体であることからproteasome inhibitorであるMG132を添加した所、有意な結合が観察された。さらに、ASCLあるいはASCL結合タンパクの過剰発現細胞において細胞周期をflow cytometryならびにcyclin Bとsecurinをモニターしたウエスタンブロットによって調べたところ、ノコダゾール処理によるM期アレスト状態をASCL結合タンパクは逸脱させるが、逆にASCLにはM期アレストを保持する作用が示された。以上の結果より、ASCLはAPCの機能を調節することによってspindle checkpointを維持していると推察された。別個に、新たなASCL結合タンパクを見出した。その因子は、DNA損傷におけるATM関連経路で機能していると考えられている。今後ASCLのpyrin domain構造に注目しながら上述のAPCに対する機能とともに、DNA damage check pointにおける役割も解析する予定である。