進行肝癌に対するインターフェロン,抗FGFR-1ヒト抗体併用療法

• Project/Area Number: 17659218
• Research Category: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Gastroenterology
• Research Institution: Sapporo Medical University
• Principal Investigator: 佐々木 茂 札幌医大, 医学部, 助手 (10305229)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 山本 博幸 札幌医科大学, 医学部, 助手 (40332910) ; 今井 浩三 札幌医科大学, 学長 (60117603)
• Project Period (FY): 2005 – 2006
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2006)
• Budget Amount: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000); Fiscal Year 2006: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 2005: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
• Keywords: 肝癌 / インターフェロン / FGFR-1 / 抗体 / 治療

Research Abstract

進行肝癌に対する治療として、IFNα/β併用5FU動脈内注入療法に加え、IFNα/βによる過剰発現を確認したfibroblast growth factor receptor-1(以下FGFR-1)に対するヒト抗体を併用し、これまでの抗癌剤を主体とした化学療法ではなく、それらの生物活性物質を主体とした治療法の検討を行い、進行肝癌に対する全く新しい治療法を確立することを目的とした。
本年度はこのうち特に、抗FGFR-1抗体の作成を行った。以下にその概要を示す。
1.FGFR-1のクローニング
HepG2細胞からhuman FGFR-1をmammalian発現ベクターにクローニングした。
2.安定発現株作成
NIH-3T3細胞にhuman FGFR-1を遺伝子導入し安定発現株を作製した。
3.免疫
human FGFR-1/NIH-3T3安定株をBALB/cマウスに腹腔内投与し免疫を行った。
4.細胞融合
血清中で力価上昇の認められたマウス脾臓を摘出し、脾臓細胞を抽出し骨髄腫細胞と細胞融合を行った。
5.抗体スクリーニング
融合細胞の培養上清でCell ELISA、FACSを行い、FGFR-1に特異的に反応するクローンを採取し、さらにサブクローニングを繰り返した。
6.抗腫瘍効果の検討
確立した抗FGFR-1マウス抗体を用い、肝癌細胞株に対して、その抗腫瘍能・抗増殖能・抗転移能の検索を行った。
現在、本抗体のヒト化を行っている。