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歯科保存領域での効果的な細胞移植再生治療の新規開発に関する基礎的研究

Research Project

Project/Area Number 17659600
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Conservative dentistry
Research InstitutionNagasaki University

Principal Investigator

林 善彦  Nagasaki University, 大学院・医歯薬学総合研究科, 教授 (20150477)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 山田 志津香  長崎大学, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助手 (00363458)
大原 直子  長崎大学, 大学院医歯薬学総合研究科, 助手 (80301365)
Project Period (FY) 2005 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥3,500,000 (Direct Cost: ¥3,500,000)
Fiscal Year 2007: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,100,000 (Direct Cost: ¥1,100,000)
Fiscal Year 2005: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Keywords間歯系幹細胞 / 細胞分化 / キトサン / 細胞性石灰化 / 間葉系幹細胞 / 遺伝子増幅
Research Abstract

今年度は関葉系幹細胞(MSC)をFGF添加のDMEM培地(FBS+、ペニスト+)で培養を行なった。また通常の維持培養に加え骨分化誘導培地にて培養を行った。通常の維持培地は60mm dishにDMEM4ml、FGF3ng/ml、100mm dishにDMEM9ml、FGF3ng/mlを添加し、コンフルになった幹細胞を骨形成誘導培地にて骨芽細胞への分化誘導に使用した。骨形成誘導培地は基本培地のDMEM(FBS+、ペニスト+)に3ng/mlFGF、10^<-7>Mデキサメタゾン、10mMグリセロリン酸、50μg/mlアスコルビン酸を添加した基本的な骨分化誘導培地に加え、基本維持培地にキトサンモノマー、キトサンオリゴマー、SK-2、キトサンポリマー、フィッシュコラーゲンをそれぞれ添加した培地を使用した。
各群の最終濃度は0.005%、0.0005%、0.00005%で行なった。培養後10日、15日、20日にアリザリンレッド染色、Ca定量にて骨分化誘導を評価した。基本的な骨分化誘導培地においては10日でアリザリンレッド染色(±)15日(+)20日(+)であったがキトサンモノマー、オリゴマー、SK-2、ポリマー、フィッシュコラーゲン、においては10日、15日、20日いずれも陰性であった。またCa定量に関して基本的な骨分化誘導培地においては15日、20日で有意差が認められたが、その他の骨分化誘導培地において有意差は認められなかった。
今回期待したキトサンによる間葉系幹細胞への積極的な骨芽細胞分化は証明できなかった。逆に、骨形成誘導培地にキトサンモノマーを添加しても、骨芽細胞への分化は阻害されないことも確認できた。したがって、生体材料としてのキトサンをスポンジ等に成形し、MSCの足場として応用することは可能と結論される。

Report

(3 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • 2005 Annual Research Report
  • Research Products

    (11 results)

All 2007 2006 2002

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Patent(Industrial Property Rights) (5 results)

  • [Journal Article] Chitosan monomer accelerates alkaline phosphatase activity on human osteoblastic cells under hypofunctional conditions2007

    • Author(s)
      Yamada S, Ganno T, Ohara N, Hayashi Y
    • Journal Title

      Journal of Biomedical Materials Research A 83

      Pages: 290-295

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Early gene expression analyzed by cDNA microarray and real-time PCR in osteoblasts cultured with chitosan monomer2007

    • Author(s)
      Ganno T, Yamada S, Ohara N, Matsunaga T, Yanagiguchi K, Ikeda T, Ishizaki H, Hayashi Y
    • Journal Title

      Journal of Biomedical Materials Research A 82

      Pages: 188-194

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Early gene expression analyzed by cDNA microarray and real-time PCR in osteoblasts cultured with chitosan monomer2007

    • Author(s)
      Ganno T, Yamadia S, Ohara N, Matsunaga T, Yanagiguchi K, Ikeda T, Hayashi Y
    • Journal Title

      Journal of Biomedical Materials Research (in press)

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Chitosan monomer accelerates alkaline phosphatase activity on human osteoblastic cells under hypofunctional conditions2007

    • Author(s)
      Yamada S, Ganno T, Ohara N, Hayashi Y
    • Journal Title

      Journal of Biomedical Materials Research (in press)

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Chitosan monomer promotes tissue regeneration on dental pulp wounds2006

    • Author(s)
      Matsunaga T, Yanagiguchi K, Yamada S, Ohara N, Ikeda T, Hayashi Y
    • Journal Title

      Journal of Biomedical Materials Research 76A(4)

      Pages: 711-720

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Chitosan monomer promotes regeneration on dental pulp wounds2006

    • Author(s)
      Matsunaga T, Yanagiguchi, Yamada S, Ohara N, Ikeda T, Hayashi Y
    • Journal Title

      Journal of Biomedical Materials research 76・4

      Pages: 711-720

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 特許2007

    • Inventor(s)
      林 善彦, 大原 直子
    • Industrial Property Rights Holder
      長崎大学
    • Industrial Property Number
      2007-126868
    • Filing Date
      2007-05-11
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 特許2007

    • Inventor(s)
      林 善彦, 山田 志津香, 池田 毅, 柳口 嘉治郎
    • Industrial Property Rights Holder
      長崎大学
    • Industrial Property Number
      2007-273714
    • Filing Date
      2007-10-11
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 機能性チューインガム2006

    • Inventor(s)
      林 善彦
    • Industrial Property Rights Holder
      長崎大学
    • Industrial Property Number
      2006-274038
    • Filing Date
      2006-10-05
    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 組織再生剤2002

    • Inventor(s)
      林 善彦
    • Industrial Property Rights Holder
      長崎大学
    • Filing Date
      2002-09-19
    • Acquisition Date
      2005-09-22
    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] キトサンオリゴ糖含有抗菌薬、齲蝕原性細菌の発育を抑制する方法2002

    • Inventor(s)
      林 善彦
    • Industrial Property Rights Holder
      長崎大学
    • Filing Date
      2002-09-02
    • Acquisition Date
      2005-10-14
    • Related Report
      2005 Annual Research Report

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Published: 2005-04-01   Modified: 2016-04-21  

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