歯髄からのミトコンドリアDNAの多型解析

• Project/Area Number: 17659665
• Research Category: Grant-in-Aid for Exploratory Research
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Social dentistry
• Research Institution: Nihon University
• Principal Investigator: 小室 歳信 日本大学, 歯学部, 教授 (50139200)
• Co-Investigator(Kenkyū-buntansha): 堤 博文 日本大学, 歯学部, 助手 (30188594) ; 向山 レイ 日本大学, 歯学部, 講師 (40059902)
• Project Period (FY): 2005
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2005)
• Budget Amount: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000); Fiscal Year 2005: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000)
• Keywords: 歯科法医学 / 歯髄 / ミトコンドリアDNA / hypervariable region / 構造解析 / C-stretch

Research Abstract

室内に1〜23年間保存された日本人永久歯140例から抽出した歯髄mtDNAを試料とし、D-loop領域に位置する高変異領域(hypervariable region、HV領域)の多型解析を行った。
まず、HV1領域(nt16081-16390)において、塩基置換や挿入あるいは欠失などの変異は77ヵ所(24.8%)に認められた。最も頻度が高かった変異はnt16223においてCがTへ置換する例で、109例(77.9%、C16223T)に認められた。C連続の配列パターン(C-stretch)は14通り出現し、最も頻度の高かったパターンはCCCCCTCCCC(5C1T4C)で81例(57.9%)に認められた。この配列はAndersonらと同じ構造を示すものであった。
つぎに、HV2領域(nt73-354)の変異について検討したところ、56ヵ所(19.9%)に認められた。A263Gがすべての試料で認められた。また、nt315とnt316の間に1塩基Cの挿入した例(nt315.1C)が135例(96.4%)出現した。両所見は日本人集団の特徴的な所見と思われる。nt248やnt316などでは塩基の欠失例が出現(0.7%)し、個人識別にはむしろ有効な所見と思われた。C-stretchは7通り出現し、8C1T6Cが63例(45.0%)出現した。Andersonらと同じ構造を示す例は認められなかった。
さらに、HV3領域(nt438-594)における変異は21ヵ所(13.4%)に認められた。T489C(64.3%)が最も頻度は高かった。C-stretchは5通り出現し、最も頻度の高かったパターンは6C(Andersonらと同じ構造)で130例(92.9%)出現した。
歯髄mtDNA140例はHV1-3領域の配列パターンによって128型に分類され、法医鑑識領域における個人識別に有用であることが判明した。