生細胞を用いたリアルタイムイメージングによるヘルペスウイルス制御因子の機能解析

• Project/Area Number: 17689020
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (A)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Virology
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 川口 寧 The University of Tokyo, 医科学研究所, 准教授 (60292984)
• Project Period (FY): 2005 – 2007
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2007)
• Budget Amount: ¥28,470,000 (Direct Cost: ¥21,900,000、Indirect Cost: ¥6,570,000); Fiscal Year 2007: ¥8,840,000 (Direct Cost: ¥6,800,000、Indirect Cost: ¥2,040,000); Fiscal Year 2006: ¥9,230,000 (Direct Cost: ¥7,100,000、Indirect Cost: ¥2,130,000); Fiscal Year 2005: ¥10,400,000 (Direct Cost: ¥8,000,000、Indirect Cost: ¥2,400,000)
• Keywords: ヘルペスウイルス / リアルタイムイメージング / HSV / 可視化 / 組み換えウイルス

Research Abstract

ダイナミックな動態を示すウイルス因子の解析には、同一の生細胞をリアルタイムで、連続的に観察するといったウイルス因子の動態解析が極めて重要となってくる。本研究では、最新のイメージング技術を駆使して、生きた感染細胞において、HSV(herpes simplex virus)がコードする様々なウイルス因子の動態を可視化する。そして、従来の研究手法では見いだせずにいた、ウイルス因子の新たな側面を明らかにし、HSV増殖機構の新たなパラダイムを構築することを目的とする。本年度は、HSVのカプシドタンパク質UL35、局在が異なる2つのテグメントタンパク質UL49、エンベロープタンパク質gBをそれぞれVenus、mPFR、ECFPで標識した組み換えウイルスYK608を用いて、感染細胞の詳細な時空間的リアルタイムイメージング解析を行った。その結果、細胞の細胞の基底面にウイルス粒子が成熟する場が複数形成されることを明らかにした。また、その場には宿主細胞のオルガネラであるトランスゴルジネットワークのマーカーが特異的に集積することが明らかになった。つまり、HSVの最終エンベロープ獲得の場がトランスゴルジネットワークであることが明らかになった。

Research Products

• [Journal Article] PILRa is a herpes simplex-1 entry co-receptor that associates with glycoprotein B (2008)
  • Author(s): T. Satoh et al
  • Journal Title: Cell 132 Pages: 1-10
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Identification of proteins directly phosphorylated by UL13 protein kinase from herpes simplex virus 1 (2007)
  • Author(s): R. Asai et al
  • Journal Title: Microbes and Infection 9 Pages: 1434-1438
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Enhanced Phosphorylation of Transcription Factor Sp1 dependent on Ataxia Telangiectasia-Mutated (ATM) in response to Herpes Simplex Virus Type I Infection (2007)
  • Author(s): S. Iwahori et al
  • Journal Title: J. Virol. 88 Pages: 9653-9664
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Herpes Simples Virus 1-Encoded Protein Kinase UL13 Phosphorylates the Viral Us3 Protein Kinase and Regulates uclear Localization of Viral Envelopment Factors UL34 and UL31. (2006)
  • Author(s): A. Kato, et. al.
  • Journal Title: J. Virol. 80 Pages: 1476-1486
• [Journal Article] Epstein-Barr Virus Protein Kinase BGLF4 Is a Virion Tegument Protein That Dissociates From Virions in a Phosphorylation Dependent Process and Phosphorylates the Viral Immediate-Early Protein BZLF1. (2006)
  • Author(s): R. Asai, et. al.
  • Journal Title: J. Virol. 80 Pages: 5125-5134
• [Journal Article] Association of two membrane proteins encoded by herpes simplex virus type2, UL11 and UL56. (2006)
  • Author(s): T. Koshizuka, et. al.
  • Journal Title: Virus Genes 32 Pages: 157-167
• [Journal Article] Construction of an infectious clone of canine herpesvirus genome as a bacterial artificial chromosome. (2006)
  • Author(s): J. Arii, et. al.
  • Journal Title: Microbes and Infection 8 Pages: 1054-1063
• [Journal Article] Identification of Proteins Phosphorylated Directly by the Us3 Protein Kinase Encoded by Herpes Simplex Virus 1. (2005)
  • Author(s): A.Kato et al.
  • Journal Title: J.Virol. 79 Pages: 9325-9331
• [Journal Article] The role of protein kinase activity expressed by the UL13 gene of herpes simplex virus 1 : The activity is not essential for optimal expression of ICP0 and UL41. (2005)
  • Author(s): M.Tanaka et al.
  • Journal Title: Virology 341 Pages: 301-312
• [Journal Article] Herpes Simplex Virus Type 1 UL51 Protein Is involved in Maturation and Egress of Virus Particles. (2005)
  • Author(s): N.Nozawa et al.
  • Journal Title: J.Virol. 79 Pages: 6947-6956
• [Journal Article] The HSV-2 membrane protein UL56 associates with the kinesin motor protein KIF1A. (2005)
  • Author(s): T.Koshizuka et al.
  • Journal Title: J.Gen.Virol. 86 Pages: 527-533
• [Presentation] Protein kinase activity of the HSV-1 Us3 is regulated by phosphorylation (2007)
  • Author(s): A. Kato and Y. Kawaguchi
  • Organizer: 32th International Herpesvirus Workshop
  • Place of Presentation: Asheville, USA
  • Year and Date: 2007-11-07
• [Remarks]
  • URL: http://www.ims.u-tokyo.ac.jp/Kawaguchi-lab/KawaguchiLabTop.html
• [Patent(Industrial Property Rights)] ウイルス粒子の3つのコンポーネントを異なる蛍光タンパク質で標識した組み換えウイルス (2006)
  • Inventor(s): 川口 寧、杉本 研
  • Industrial Property Rights Holder: 国立大学法人東京大学
  • Industrial Property Number: 2006-318534
  • Filing Date: 2006-11-27