メダカにおける性転換変異体の解析による雌化機構

• Project/Area Number: 17770054
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Morphology/Structure
• Research Institution: Kumamoto University
• Principal Investigator: 北野 健 熊本大学, 大学院・自然科学研究科, 助教授 (40336219)
• Project Period (FY): 2005 – 2006
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2006)
• Budget Amount: ¥3,600,000 (Direct Cost: ¥3,600,000); Fiscal Year 2006: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000); Fiscal Year 2005: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
• Keywords: 性転換 / 性分化 / メダカ

Research Abstract

メダカは、XY/XX型の性決定機構を持ち、ゲノムシークエンスの完成、多くの近交系統が存在しているなど、変異体解析にも大変優れた実験動物である。申請者は、遺伝的性を外観で識別できる系統にolvas-GFPコンストラクト(生殖細胞をGFP蛍光で可視化できるベクター;基礎生物学研究所田中先生より分譲)を遺伝子導入してトランスジェニック系統を作製し、その系統の中でolvas-GFPコンストラクトの導入により遺伝的雌が雄へと性転換する遺伝子変異系統(性転換変異体)を見出していた。
昨年度、この系統におけるホモ型雌10個体中に3個体が雄へと性転換していることが分かったため、この性転換雄(XX)と性転換していない雌(XX)とを交配して遺伝的雌(XX)集団を作製して性比を調べた。その結果、すべての個体が雌へと分化していた。さらに、この雌と性転換雄とを戻し交配した結果、やはりすべての個体が雌へと分化していた。このことから、この性転換変異体は、遺伝的要因にのみ支配されているわけではなく、何かの環境要因も影響しているのではないかと考えられた。
次に、Sleeping Beautyトランスポゾンを用いた性転換変異系統の作製を試みた。その結果、遺伝的雌が雄へと性転換する遺伝子変異系統を1系統作製することに成功した。今後は、ホモ型個体のゲノムDNAをテンプレートに用い、ゲノムウオーキングPCRを行って原因遺伝子の単離及び解析を行う予定である。

Research Products

• [Journal Article] Size-selective junctional barrier and Ca2+ independent cell adhesion in the testis of Cynops pyrrhogaster : expression and function of occludin. (2007)
  • Author(s): Jin, Y., Uchida, I., Eto, K., Kitano, T., Abe, S.-I.
  • Journal Title: Molecular Reproduction and Development (In press)
• [Journal Article] Stereoselective reduction of 4-benzoylpyridine in the heart of vertebrate. (2007)
  • Author(s): Shimada, H., Imaishi, K., Hirashima, T., Kitano.T., Ishikura, S., Hara, A., Imamura, Y.
  • Journal Title: Life Science 80 Pages: 554-558
  • NAID: 120005254872
• [Journal Article] Transactivation activity of thyroid hormone receptors in fish (Conger myriaster) in response to thyroid hormones. (2006)
  • Author(s): Kawakami, Y., Shin, D.H., Kitano, T., Adachi, S., Yamauchi, K., Ohta, H.
  • Journal Title: Comparative Biochemical and Biophysiology B 144 Pages: 503-509
• [Journal Article] Organochlorine contaminants in human adipose tissues from China : mass balance approach for estimating historical exposure to DDTs by Chinese. (2005)
  • Author(s): Nakata, H., Nasu, T., Abe, S., Kitano, T., Fan, Q., Li W., Ding, X.
  • Journal Title: Environmental Science and Technology 39 Pages: 4714-4720
• [Journal Article] Tamoxifen induces masculinization of genetic females and regulates P450 aromatase and Mullerian inhibiting substance mRNA expression in Japanese flounder (Paralichthys olivaceus)
  • Author(s): Kitano.T., Yoshinaga, N., Shiraishi, E., Koyanagi, T., Abe, S.-I.
  • Journal Title: Molecular Reproduction and Development (In press)
• [Journal Article] Assessment of estrogenic chemicals using an estrogen receptor α (ERα)- and ERβ-mediated reporter gene assay in fish
  • Author(s): Kitano.T., Koyanagi, T., Adachi, R., Sakimura, N., Takamune, K., Abe, S.-I.
  • Journal Title: Marine Biology (In press)
• [Journal Article] ヒラメにおける生殖腺の性分化機構
  • Author(s): 北野 健
  • Journal Title: 水産総合研究センター研究報告 (In press)
  • NAID: 220000102341