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高等植物におけるタンパク質プレニル基転移酵素の生理機能の解明

Research Project

Project/Area Number 17770107
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Functional biochemistry
Research InstitutionTohoku University

Principal Investigator

高橋 征司  東北大学, 大学院・工学研究科, 助手 (90343061)

Project Period (FY) 2005 – 2006
Project Status Completed (Fiscal Year 2006)
Budget Amount *help
¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
Fiscal Year 2005: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
Keywords植物 / ストレス応答 / プレニル鎖延長酵素 / プレニル化 / イソプレノイド / シグナル伝達 / プロテオーム / プレニル化タンパク質 / プレニル基転移酵素
Research Abstract

動物のみならず高等植物においても、タンパク質のプレニル化が報告されている。これまでに解析されているプレニル化タンパク質の多くがファルネシル基やゲラニルゲラニル基による修飾を受けているが、近年、さらに長鎖のイソプレノイドであるドリキル基やポリプレニル基が共有結合しているタンパク質の存在が報告されてきている。そこで、シロイヌナズナにおける長鎖ポリイソプレノイドの基本骨格生合成を触媒するシス型プレニル鎖延長酵素について生理機能解析を行った。シロイヌナズナにおいてタンパク質に結合している長鎖ポリプレニル基はC_<45>、C_<50>、C_<75>、C_<80>が報告されている。シロイヌナズナにおけるシス型プレニル鎖延長酵素の相同遺伝子のうちすでに6種について酵素活性と反応生成物の解析を行っており、これらの活性が上記のプレニル基に対応していることが予想された。さらに、新たにシス型プレニル鎖延長酵素相同遺伝子であるAtCPT5を単離し、この遺伝子を異種発現させた大腸菌や酵母の粗酵素抽出液を用いて酵素反応を行い、その生成物を解析したところ、AtCPT5は、C_<305>のプレニル鎖を生合成する新奇の活性を示すことが明らかになった。GFP融合タンパク質を用いた解析により、AtCPT5は小胞体に局在することが示された。また、AtCPT5の遺伝子発現は、低温ストレスをはじめとする種々のストレス処理によって誘導されることが明らかになった。AtCPT5のプロモーター領域とGUSを連結したコンストラクトを導入した形質転換シロイヌナズナについて、組織化学染色で発現組織を詳細に解析したところ、AfCPT5は根と茎頂分裂組織のみで発現が確認され、ストレスによる発現誘導も根においてのみ観察された。以上のことより、新奇なプレニル鎖延長酵素活性を示すAtCPT5は、シロイヌナズナの根における環境ストレス応答機構に関与している可能性が示された。

Report

(2 results)
  • 2006 Annual Research Report
  • 2005 Annual Research Report
  • Research Products

    (8 results)

All 2007 2006 2005

All Journal Article (6 results) Book (2 results)

  • [Journal Article] Novel fluorescent analogues for transmembrane movement study of polyprenyl phosphates2007

    • Author(s)
      Koichi Koseki
    • Journal Title

      Bioorganic & Medical Chemistry Letters 17

      Pages: 946-950

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] An Isoflavone Conjugate-Hydrolyzing β-Glucosidase from the Roots of Soybean (Glycine max) Seedlings PURIFICATION, GENE CLONING, PHYLOGENETICS, AND CELLULAR LOCALIZATION2006

    • Author(s)
      Hirokazu Suzuki
    • Journal Title

      J. Biol. Chem 281

      Pages: 30251-30259

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Structure and Function of cis-Prenyl Chain Elongating Enzymes2006

    • Author(s)
      Seiji Takahashi
    • Journal Title

      The Chemical Record 6

      Pages: 194-205

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Manipulation of prenyl chain length determination mechanism of cis-prenyltransferases.2006

    • Author(s)
      Yugesh Kharel
    • Journal Title

      FEBS Journal 273

      Pages: 647-657

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] The Regulatory Domain of SRK2E/OST1/SnRK2.6 Interacts with ABI1 and Integrates Abscisic Acid (ABA) and Osmotic Stress Signals Controlling Stomatal Closure in Arabidopsis.2006

    • Author(s)
      Riichiro Yoshida
    • Journal Title

      Journal of Biological Chemistry 281

      Pages: 5310-5318

    • Related Report
      2005 Annual Research Report
  • [Journal Article] イソプレノイド生合成酵素の分子解析2005

    • Author(s)
      高橋征司
    • Journal Title

      化学と生物 43

      Pages: 296-304

    • NAID

      10019045065

    • Related Report
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  • [Book] Subcellular Biochemistry Volume 39 : Biology of Inositols and Phosphoinositide(担当部分 : Inositol and their metabolites in abiotic and biotic stress responses.)2006

    • Author(s)
      Teruaki Taji
    • Total Pages
      340
    • Publisher
      Springer press
    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Book] "ファイバー"スーパーバイオミメティックス-新未来の新技術創成-(担当部分 : 天然ゴム生合成機構の解明と高生産系構築への展望)2006

    • Author(s)
      高橋征司
    • Total Pages
      1236
    • Publisher
      株式会社エヌ・ティー・エス
    • Related Report
      2006 Annual Research Report

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Published: 2005-04-01   Modified: 2016-04-21  

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