Research Project
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
(1)背景多くの癌組織、癌細胞のmtDNAに体細胞変異が蓄積していることが明らかにされている。この体細胞変異の蓄積が、癌の促進に関与したために変異mtDNAをもっ癌細胞が多くなったのか、明らかにされ、アポトーシスの抑制効果の結果であることが判明したので、抗癌剤への耐性へのミトコンドリアDNAの役割を明らかにしようとした。(2)サイブリドの作製細胞には核ゲノムとミトコンドリアゲノムが共存しているので、mtDNAの役割を明らかにするためには、核が共通でmtDNAだけが異なる細胞を比較しなければならない。そこで、mtDNAを消失しているHeLa細胞と脱核した細胞質を融合し、核が共通で正常mtDNAをもつ細胞と変異mtDNAをもつ細胞を作製した。この融合細胞を細胞質の融合であるのでサイブリド(cybrid)と呼ぶ。このサイブリドを用いて、mtDNAの癌のアポトーシ耐性効果、抗癌剤への耐性効果を調べた。(3)抗癌剤へ対する耐性獲得とmtDNA変異mtDNA変異によってアポトーシスが抑制されたので、抗癌剤への耐性へのmtDNAの役割についてサイブリドを用いて解析した。変異mtDNAをもつサイブリドは正常mtDNAをもつサイブリドよりも抗癌剤耐性であることをフローサイトメーターにより明らかにした。抗癌剤はシスプラチンと5-フルオロウラシンを用いた。(4)温熱効果変異mtDNAをもつ癌細胞への抗癌剤の作用を改善するために、温熱処理と抗癌剤処理を併用させた。するとmtDNAに変異がある場合でも、抗癌剤の効果が改善された。すなわち、mtDNAに変異がある場合には、抗癌剤と温熱療法を併用すると効果的であることを示唆された。
