悪性グリオーマにおけるDNA二重鎖切断修復遺伝子制御による新規放射線療法の開発

• Project/Area Number: 17790974
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Cerebral neurosurgery
• Research Institution: Ehime University
• Principal Investigator: 原田 広信 愛媛大学, 医学部附属病院, 講師 (20335897)
• Project Period (FY): 2005 – 2006
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2006)
• Budget Amount: ¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000); Fiscal Year 2006: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000); Fiscal Year 2005: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
• Keywords: Ku70 / Ku80 / siRNA / HVJ-E vector / グリオーマ

Research Abstract

DNA二重鎖切断の重要な修復機構である「非相同末端結合修復」に関わるKu70及びKu80の悪性グリオー射線抵抗性への関与を解明し、Ku70及びKu80に対するsiRNAを用いてDNA修復機構を制御することが、悪性グリオーマの放射線感受性をさらに高めた新たな治療法と成り得るか否かを検討した。
これまでに、グリオーマ手術標本を用いて、DNA修復関連遺伝子が悪性グリオーマにおいて過剰に発現し、放射線治療抵抗性の主因であることを報告してきた。そこでKu70及びKu80に対するsiRNAを作成し、グリオーマ細胞株におけるKu70及びKu80 mRNA/蛋白発現が抑制されることを確認し、今後のヒトへの臨床応用を目指して、HVJ-Eベクターを用いた導入実験を行った。まず、導入効率及び細胞毒性の検討を行い、次にグリオーマ細胞株においてHVJ-EベクターによりKu70及びKu80に対するsiRNAを導入し、colony forming assayを用いて放射線作用増強効果を確認した。In vivo実験ではヒトグリオーマ皮下腫瘍モデルを作成し、HVJE-vectorにより高率に導入されたKu70及びKu80に対するsiRNAより放射線治療効果が増強されることを確認した。
HVJ-Eベクターを用いてKu70及びKu80 siRNAを導入することで、安全にDNA修復機構を制御でき、ヒト悪性グリオーマにおける放射線感受性を高めた新たな治療法と成り得る可能性を証明した。

Research Products

• [Journal Article] Silencing hypoxia-inducible factor-lalpha inhibits cell migration and invasion under hypoxic enviroment in malignant gliomas. (2007)
  • Author(s): Fujiwara S, Nakagawa K, Harada H, et al.
  • Journal Title: Int J Oncol 30 Pages: 793-802
• [Journal Article] PTEN gene transfer suppresses the invasive potential of human malignant gliomas by regulating cell invasion-related molecules. (2006)
  • Author(s): Furukawa K, Kumon Y, Harada H, et al.
  • Journal Title: Int J Oncol 29 Pages: 73-81
• [Journal Article] Down-regulation of laminin α 4 chain expression inhibits glioma invasion in vitro and in vivo (2005)
  • Author(s): Nagato S, Nakagawa K, Harada H, et al.
  • Journal Title: Int J Cancer 117 Pages: 41-50
• [Journal Article] PTEN gene transfer suppresses the invasive potential of human malignant gliomas by regulating cell invasion-related molecules
  • Author(s): Furukawa K, Harada H, Ohnishi T, et al.
  • Journal Title: Int J Oncol (In press)