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マウスおよびヒト加齢卵子におけるオーロラ蛋白およびミトコンドリアの機能変化の解析

Research Project

Project/Area Number 17791099
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Obstetrics and gynecology
Research InstitutionHirosaki University

Principal Investigator

渡邉 誠二  Hirosaki University, 大学院・医学研究科, 助教 (10241449)

Project Period (FY) 2005 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥3,500,000 (Direct Cost: ¥3,500,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2005: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Keywords卵子 / 精子 / 染色体異常 / オーロラ蛋白 / チューブリン / 染色体 / 細胞骨格 / 加齢 / 微小管
Research Abstract

【実験】誘発排卵時に得られる未成熟卵子は体外培養することでMII期へと移行し成熟卵子となる。このヒトIVM卵子には高頻度に姉妹染色分体早期分離(PSC)が生じるとともに受精後の胚盤胞発生率が低いという加齢卵子と共通の特徴がみられる。このことから我々はIVM卵子を加齢卵子の救済法研究のモデルとして実験利用し、GV期にタキソール処理することで上述の加齢卵子と共通の特徴が改善されることを既に報告した。今回はタキソール処理したIVM卵子において細胞骨格の構成要素である微小管及び染色体の配列と分配に関わるオーロラ蛋白の分布を蛍光免疫染色法により検索した。採卵時に得られたGV卵子を0.05μg/m1タキソールで2時間処理し、処理直後及び体外培養後のMII期にホルマリン固定した。PBSで卵子を洗浄後、一次抗体にマウス抗チューブリン抗体及びウサギ抗オーロラA抗体を、二次抗体にローダミン標識抗マウス抗体及びFITC標識抗ウサギ抗体を用いて免疫染色を行った。タキソール未処理群を対照とした。また抗体の有効性を確認するためマウスGV期及びMII卵子をポジティブコントロールに用いた。【結果】ヒトGV期において未処理群ではチューブリンが表層に分布したのに対しタキソール処理群では細胞質全体に分布する傾向があった。ヒトMII期では未処理及び処理群共にチューブリンは紡錘体を形成するとともに表層に分布した。マウスGV期及びMII期においてもヒト卵子対照群と同様の傾向であった。一方、オーロラ蛋白はヒト卵子では核への局在が認められなかったが、マウスではGV期及びMII期共にDNAに強く局在していた。【結論】タキソール処理によりチューブリンが細胞質全体に分布することでPSCが抑制されている可能性が示唆された。ヒト卵子ではオーロラA分布がマウスと異なる可能性が示唆されたが、染色条件などの影響も考えられた。

Report

(3 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • 2005 Annual Research Report
  • Research Products

    (7 results)

All 2008 2007

All Journal Article (2 results) Presentation (5 results)

  • [Journal Article] 核置換卵子の発生と染色体分配2008

    • Author(s)
      渡邉誠二
    • Journal Title

      産婦人科の実際 (印刷中)

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Journal Article] 核置換卵子の染色体異常2007

    • Author(s)
      渡邉 誠二
    • Journal Title

      日本生殖医療エンジニアリング研究会 2・1

      Pages: 4-4

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Presentation] 核置換卵子の活性化と染色体分配2008

    • Author(s)
      渡邉誠二
    • Organizer
      日本解剖学会
    • Place of Presentation
      大分
    • Year and Date
      2008-03-29
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] タキソール処理IVM卵子の染色体と発生2007

    • Author(s)
      渡邉誠二
    • Organizer
      日本受精着床学会 シンポジウム
    • Place of Presentation
      仙台
    • Year and Date
      2007-08-31
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] 核置換卵子の活性化と染色体分配2007

    • Author(s)
      渡邉誠二
    • Organizer
      日本受精着床学会
    • Place of Presentation
      仙台
    • Year and Date
      2007-08-30
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] Studies on the mechanism of the oocyte aging2007

    • Author(s)
      Seiji Watanabe
    • Organizer
      4th Japan Canada Bilateral Workshop on Human Reproduction & Reproductive Biology
    • Place of Presentation
      Hirosaki, JAPAN
    • Year and Date
      2007-08-01
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] 老齢雌由来マウスMII卵子の染色体に及ぼす核置換の影響2007

    • Author(s)
      渡邉誠二
    • Organizer
      弘前医学会
    • Place of Presentation
      大館
    • Year and Date
      2007-06-09
    • Related Report
      2007 Annual Research Report

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Published: 2005-04-01   Modified: 2016-04-21  

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