| Project/Area Number |
17791316
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Morphological basic dentistry
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| Research Institution | The Nippon Dental University |
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Principal Investigator |
筒井 健夫 The Nippon Dental University, 生命歯学部, 講師 (70366764)
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| Project Period (FY) |
2005 – 2007
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2007)
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| Budget Amount *help |
¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000)
Fiscal Year 2007: ¥500,000 (Direct Cost: ¥500,000)
Fiscal Year 2006: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 2005: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
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| Keywords | 幹細胞 / 歯 / 上皮 / 上皮間葉相互作用 / 硬組織 / 分化 / 未分化 / 間葉系細胞 / 歯随細胞 / 歯肉線維芽細胞 |
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| Research Abstract |
1.ヒト歯髄からコラゲナーゼとディスパーゼを用いて細胞を分離し、継代培養を行い、コロニー形成率の観察を行った。また、RT-PCRを行い、bone sialoprotein(BSP),type I collagen,alkalinephosphatase(ALP)の発現を確認した。ウエスタンブロットにより、BSPのタンパク発現も確認した。次に、幹細胞の特徴の一つである多分化能を解析するため、細胞を様々な分化培地で培養したところ、石灰化が確認され、かつ脂肪細胞や神経細胞への分化も確認された。免疫不全マウスを用いたin vivo実験においてハイドロキシアパタイト/リン酸三カルシウムと共に皮下移植を行った。移植片はH-E染色より象牙質様硬組織と歯髄様組織が観察された。また、免疫組織化学染色よりBSP,dentin matrix protein 1(DMP1),dentin sialoprotein(DSP)が確認された。
2.ヒト歯肉とヒト歯肉上皮細胞においてもRT-PCRを行いbone sialoprotein(BSP),type I collagen,alkaline phosphatase(ALP)の発現を確認した。免疫不全マウスを用いたin vivo実験において皮下移植を行った。移植片をH-E染色したが、象牙質様硬組織は確認されなかった。
3.上皮間葉相互作用を解析するために、ヒト歯髄細胞とヒト歯肉細胞または、ヒト歯髄細胞とヒト上皮細胞を共培養し、細胞の石灰化能を観察した。その結果、共培養群では単独培養群と比べて石灰化の増大が観察された。またRT-PCRにより、DSP,Osteocalcinの発現が認められた。
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