骨および神経細胞の増殖・分化におけるビオプテリン補酵素の作用機序の探査
| Project/Area Number |
17791329
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Functional basic dentistry
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| Research Institution | Meikai University |
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Principal Investigator |
藤本 健吾 明海大学, 歯学部, 助手 (90286013)
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| Project Period (FY) |
2005 – 2006
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2006)
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| Budget Amount *help |
¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
Fiscal Year 2005: ¥2,100,000 (Direct Cost: ¥2,100,000)
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| Keywords | セピアブテリン還元酵素 / ビオプテリン補酵素 / ノックアウトマウス / セピアプテリン還元酵素 |
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| Research Abstract |
私は、骨芽細胞へのセピアプテリン還元酵素(SPR)アンチセンスオリゴヌクレオチドの導入で、SPRおよびSPRが生成する物質であるビオプテリン補酵素(BH4)が骨芽細胞の増殖能に関係していることを見つけ出した(平成17年度科学研究費補助金による)。また、BH4は一酸化窒素合成酵素(NOS)の補酵素であるため、神経伝達物質合成に不可欠な因子である。さらに、NO-cGMP系が、神経細胞の樹状突起の伸長に関与しているとの報告がある。以上のように、骨吸収や神経細胞の分化に関与する酵素がBH4を必須の補酵素として要求することから、SPRおよびSPRの生成するBH4がどのように細胞の増殖分化に関与するのか検討した。
(1)BH4の関与する転写因子の検索:BH4を骨芽細胞で大量に生成させ、細胞の核抽出物をELISA法を用いた転写因子発現量の変化を検討したところ、BH4が細胞増殖に関与する転写因子c-junの発現を増強させることが判明した。十数種の転写因子について調査したが、この転写因子以外に発現量に変化は認められなかった。
(2)SPR結合タンパク質の探査:Strep・Tactin-Tagを融合させたSPR酵素を骨芽細胞で発現させた。細胞抽出物をStrep・Tactin抗体で免疫沈降させ、そのタンパク質をSDS電気泳動で分析したところ、SPRに数種のタンパク質が結合していることが判明した。
今回、細胞内BH4量変化により細胞増殖に関与する転写因子c-junの発現の増強がみられ、また、数種のタンパク質がSPRタンパク質と結合するという事実が判明した。これらのタンパク質は、現在、MSで分析中であり、結果の分析が待たれる。
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Report
(2 results)
Research Products
(1 results)
