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ヒト骨芽細胞の恒常性維持におけるK^+チャネル応答機構の解析

Research Project

Project/Area Number 17791337
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Functional basic dentistry
Research InstitutionAichi Gakuin University

Principal Investigator

蛭川 幸史  Aichi Gakuin University, 歯学部, 非常勤助教 (60340147)

Project Period (FY) 2005 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥3,700,000 (Direct Cost: ¥3,700,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2005: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
Keywords骨芽細胞 / K^+チャネル / パッチクランプ法 / ATP / 細胞内Ca^<2+>濃度 / IKチャネル / BKチャネル / 細胞内カルシウム / パッチクランプ / カルシウム / メカノセンサー
Research Abstract

ヒト骨肉腫由来の市販細胞(MG-63、 HOS、 SaOS-2細胞)およびヒト由来の骨芽細胞(SaM-1細胞)において、 Ca^<2+>依存性K^+チャネル(BK, IK, SK1, SK2, SK3チャネル)のmRNA発現をRT-PCR法にて確認したところ、すべての細胞においてBKチャネルmRNAの発現が認められた。一方、IKはSaM-1、 MG-63およびSaOS-2細胞に、SK1はSaOS-2およびHOS細胞に、SK2はHOS細胞に、SK3はMG-63、 SaOS-2およびHOS細胞に認められた。
また、定量的PCR法(Rea1-Time PCR法)において、ヒト骨肉腫およびSaM-1細胞に存在するBKチャネルは、チャネルを構成する主な構成成分であるBKαサブユニットは多量に存在するが、BKβサブユニット発現はほとんど認められないことを確認した。また、パッチクランプ法のシングルチャネル解析より、SaM-1細胞には電気生理学的にCa^<2+>依存性のK^+チャネルが2種類存在することを同定し、コンダクタンス値、Ca^<2+>依存性、電位依存性の有無よりこれら2種類のK^+チャネルが、BKチャネルとIKチャネルである可能性を強く示唆した。さらに、細胞外ATPの添加によりSaM-1細胞の細胞内Ca2+濃度上昇が主にP2Y受容体を介することを我々はすでに報告しているが、パッチクランプ法のホールセルクランプにおける開口薬と遮断薬を用いた検討により、BKおよびIKチャネルが薬理学的にも存在し、ATP添加による細胞内Ca2+濃度上昇に伴う脱分極が、charybdotoxinやclotrimazoleにより抑制されたことから、ヒト骨芽細胞における受容体を介したIKチャネルの活性化の可能性を示した。

Report

(3 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • 2005 Annual Research Report
  • Research Products

    (2 results)

All 2007 2005

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 1 results)

  • [Journal Article] Effects of Static Magnetic Field on Mineralization of MC3T3-E1 Cells2007

    • Author(s)
      Y Imaizumi, S Ozawa, K Hirukawa, A Togari, Y Tanaka
    • Journal Title

      Prosthodontic Research & Practice 6(2)

      Pages: 87-92

    • NAID

      10020160763

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] ヒト骨芽細胞におけるBKチャネルの解析2005

    • Author(s)
      蛭川幸史, 村木克彦, 大矢 進, 今泉祐治, 戸苅彰史
    • Journal Title

      口腔組織培養学会誌 14・1

      Pages: 21-22

    • Related Report
      2005 Annual Research Report

URL: 

Published: 2005-04-01   Modified: 2016-04-21  

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