歯周病細菌の病原性株に特異的な遺伝子群の解析

• Project/Area Number: 17791582
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Social dentistry
• Research Institution: Kyushu Dental College
• Principal Investigator: 吉田 明弘 九州歯科大学, 保健医療フロンティア科学分野, 助手 (20364151)
• Project Period (FY): 2005 – 2006
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2006)
• Budget Amount: ¥3,100,000 (Direct Cost: ¥3,100,000); Fiscal Year 2006: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000); Fiscal Year 2005: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
• Keywords: Porpbyromonas gingivalis / 歯周炎 / subtractive hybridization / バイオフィルム / Porphyromonas gingivalis

Research Abstract

歯周病細菌の1つとして注目されているPorpbyromonas gingivalis(Pg)の菌株間における病原性は多様であり、病原性の強い株と弱い株が存在することは知られているが、これらめ病原性の違いを規定する遺伝子群は決定されていない。本研究では同細菌の菌株特異的な遺伝子領域とそれらの病原性の違いについて解析し、それらの遺伝子領域と病原性およびバイオフィルム形成能との関係を調べた。
PgW83株に特異的な遺伝子領域をATCC33277株とsubtractive hybridization法を用いて比較することにより同定した。同法によって得られたW83株に特異的な遺伝子を薬剤耐性遺伝子で挿入失活した変異株を作製した。さらに変異株と親株について、ポリ塩化ビニルプレート上におけるバイオフィルム形成能の違いについて解析した。
Subtractive hybridization法を用いて575個のコロニーが得られ、そのうち32個のPgW83株に特異的なDNA断片が得られた。そのうち3種類において変異株を作製した。変異株のうち、ヒスチジンキナーゼに関与する遺伝子のパイオフィルムの形成量が他の菌に比べて少ないことが明らかになった。さらにヒスチジンキナーゼ関連遺伝子を欠失した変異株をBALB/cマウスに接種したところ、W83株を接種した場合と比べて生存率が高くなった。このことからヒスチジンキナーゼ関連遺伝子のバイオフィルム形成能と病原性の間に関係があることが示唆された。

Research Products

• [Journal Article] Loop-mediated isothermal amplification method for the rapid detection of Enterococcus faecalis in infected root canals. (2007)
  • Author(s): Kato, H., Yoshida.A., Ansai, T., Watari, H., Notomi, T., Takehara, T.
  • Journal Title: Oral Microbiol. Immunol. 22 Pages: 131-135
• [Journal Article] Prediction of cognitive function by arterial stiffness in the very elderly. (2006)
  • Author(s): Fukuhara, M., Matsumura, K., Ansai, T., Takata, Y., Sonoki, K., Akifusa, S., Wakisaka, M., Hamasaki, T., Fujisawa, K., Yoshida.A., Fujii, K., Iida, M., Takehara, T.
  • Journal Title: Circulation. J 70 Pages: 756-761
  • NAID: 110004750154
• [Journal Article] Multiplex polymerase chain reaction assay for simultaneous detection of black-pigmented Prevotella species in oral specimens. (2006)
  • Author(s): Yoshida, et al.
  • Journal Title: Oral Microbiology and Immunology 20 Pages: 43-46
• [Journal Article] Quantitative detection of volatile sulphur compound-producing microorganisms in oral specimens using by real-time PCR (2005)
  • Author(s): Kato, H.Yoshida, A.et al.
  • Journal Title: Oral Disease 11 Pages: 67-71
• [Journal Article] LuxS-based signaling affects Streptococcus mutans biofilm formation. (2005)
  • Author(s): Yoshida, A.et al.
  • Journal Title: Applied and Environmental Microbiology 71 Pages: 2372-2380
• [Journal Article] Loop-mediated isothermal amplification method for rapid detection of periodontopathic bacteria, Porphyromonas ginigvalis Tannerella forsythia and Treponema denticola (2005)
  • Author(s): Yoshida, A.et al.
  • Journal Title: Journal of Clinical Microbiology 43 Pages: 2418-2424
• [Journal Article] Use of the genomic subtractive hybridization for the quantitative detection of oral Prevotella spp. assessed using real-time PCR. (2005)
  • Author(s): Nagashima, S, Yoshida, A.et al.
  • Journal Title: Journa of Clinical Microbiology 43 Pages: 2948-2951
• [Journal Article] Rapid Detection of the Cariogenic Pathogens Streptococcus mutans and Streptococcus sobrinus using Loop-Mediated Isothermal Amplification.
  • Author(s): Nagashima, S., Yoshida.A., Ansai, T., Watari, H., Notomi, T., Maki, K., Takehara, T.
  • Journal Title: Oral Microbiol. Immunol. (印刷中)
• [Journal Article] Prevalence of periodontopathic bacteria on the tongue dorsum of elderly people.
  • Author(s): Tachibana, M., Yoshida.A., Ansai, T., Takata, Y., Akifusa, S., Fukuhara, M., Hamasaki, T., Okuda, K., Takehara, T.
• [Journal Article] Rapid detection of Actinobacillus actinomycetemcomitans using Loop-Mediated Isothermal Amplification Method. Oral Microbiol. Immunol.
  • Author(s): Osawa, R., Yoshida, A., Masakiyo, Y., Nagashima, S., Ansai, T., Watari, H., Notomi, T., Takehara, T.
  • Journal Title: Oral Microbiol. Immunol. (印刷中)
• [Book] 竹原直道、廣藤卓雄 監修 : 必修 臨床研修歯科医ハンドブック (2006)
  • Author(s): 吉田明弘
  • Total Pages: 361
  • Publisher: 医歯薬出版
• [Book] LAMP法による口腔細菌の迅速検出.歯周病細菌. (2005)
  • Author(s): 吉田明弘, 他
  • Total Pages: 5
  • Publisher: 医歯薬出版