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多点固定化により金属タンパク質を精密複合化した電極材料の構築とバイオデバイス応用

Research Project

Project/Area Number 17J01654
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Organic and hybrid materials
Research InstitutionOsaka University

Principal Investigator

井上 望  大阪大学, 工学研究科, 特別研究員(DC1)

Project Period (FY) 2017-04-26 – 2020-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2019)
Budget Amount *help
¥2,800,000 (Direct Cost: ¥2,800,000)
Fiscal Year 2019: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2018: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2017: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Keywordsタンパク質修飾 / N末端選択的修飾 / ヘムタンパク質 / タンパク質固定化 / クリックケミストリー / Dimroth転位反応
Outline of Annual Research Achievements

バイオ燃料電池はエネルギー分野や農業分野あるいは医療分野への応用が期待されるバイオデバイスである。とくに金属タンパク質の酸化還元反応を用いたバイオ燃料電池の高性能化において、より高い電極特性を達成するためには、タンパク質と電極材料間の効率的電子移動の実現が強く求められる。そこで、金属タンパク質を電極上に多点で固定化し、活性中心となる補因子の配向性を制御する系を構築するために、合成化学的アプローチと生化学的アプローチを統合した金属タンパク質-電極材料複合化手法の確立をめざした。具体的には活性中心に補因子ヘムを有する電子伝達タンパク質シトクロムb562をモデルタンパク質に選定した。シトクロムb562の二点固定化に向け、前年度見出したN末端選択的な機能性分子修飾剤である1,2,3-トリアゾールカルボアルデヒド(TA4C)を用いたN末端選択的なアジド基の導入を試みた。
合わせて、TA4Cの簡便な合成手法の開発に取り組んだ。従来法において、TA4C誘導体はアルキンとアジドを前駆体とし、銅を触媒とする環化付加反応(CuAAC反応)により調製していたが、反応後に煩雑な精製操作を必要とする点が課題であった。本研究では、トリアゾールカルボアルデヒドに特徴的なDimroth転位反応を活用し、アミンを前駆体とする簡便かつ精製操作が不要のTA4C調製法を確立した。本手法を用いることで、市販されているアミン前駆体を一段階でTA4C誘導体へと変換し、タンパク質修飾へと直接用いることが可能となった。本手法は、反応剤と市販のアミン前駆体を混合、加熱するだけでN末端修飾剤を簡便に調製できるため、有機合成化学を専門としない生化学・薬学・医学分野の研究者も容易に実施可能である。今後、本手法を用いた抗体薬剤複合体の構築やバイオハイブリッド材料への応用が期待される。

Research Progress Status

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(3 results)
  • 2019 Annual Research Report
  • 2018 Annual Research Report
  • 2017 Annual Research Report
  • Research Products

    (14 results)

All 2020 2019 2018 2017 Other

All Journal Article (2 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results,  Peer Reviewed: 2 results) Presentation (6 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results) Remarks (2 results) Patent(Industrial Property Rights) (4 results) (of which Overseas: 1 results)

  • [Journal Article] Triazolecarbaldehyde Reagents for One‐Step N‐Terminal Protein Modification2020

    • Author(s)
      Onoda Akira、Inoue Nozomu、Sumiyoshi Eigo、Hayashi Takashi
    • Journal Title

      ChemBioChem

      Volume: 21 Issue: 9 Pages: 1274-1278

    • DOI

      10.1002/cbic.201900692

    • Related Report
      2019 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Int'l Joint Research
  • [Journal Article] Site-Specific Modification of Proteins through N-Terminal Azide Labeling and a Chelation-Assisted CuAAC Reaction2019

    • Author(s)
      Inoue Nozomu、Onoda Akira、Hayashi Takashi
    • Journal Title

      Bioconjugate Chemistry

      Volume: 30 Issue: 9 Pages: 2427-2434

    • DOI

      10.1021/acs.bioconjchem.9b00515

    • Related Report
      2019 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Presentation] トリアゾールカルボアルデヒド誘導体を用いたタンパク質N末端選択的修飾剤の開発2019

    • Author(s)
      井上望、住吉永伍、 小野田 晃、 林 高史
    • Organizer
      日本化学会第99春季年会
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] ペプチドN末端修飾剤として用いるトリアゾールカルボアルデヒド誘導体の構造と反応性の評価2019

    • Author(s)
      住吉永伍、井上望、 小野田 晃、 林 高史
    • Organizer
      日本化学会第99春季年会
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] キレート促進型CuAAC反応によるタンパク質N末端の位置選択的修飾2018

    • Author(s)
      井上望、 小野田 晃、 林 高史
    • Organizer
      第30回生体機能関連化学若手の会サマースクール
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] N末端へのアジド基導入とキレート促進型CuAAC反応を可能にする位置選択的タンパク質修飾方法の開発2018

    • Author(s)
      井上望、 小野田 晃、 林 高史
    • Organizer
      第12回バイオ関連化学シンポジウム
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] N-terminus Specific Modification of Native Proteins through Chelation-assisted CuAAC Reaction2018

    • Author(s)
      Nozomu Inoue, Akira Onoda, Takashi Hayashi
    • Organizer
      日本化学会第98春季年会
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
  • [Presentation] Construction of a Bioelectrode with Controlled Hemoprotein Orientation using Cofactor-specific Click Chemistry2017

    • Author(s)
      Nozomu Inoue, Akira Onoda, Stéphane Campidelli, Takashi Hayashi
    • Organizer
      Joint Symposium Aachen-Osaka Selectivity in Chemo- and Biocatalysis
    • Related Report
      2017 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Remarks] 林研究室HP

    • URL

      http://www.chem.eng.osaka-u.ac.jp/~hayashiken/

    • Related Report
      2019 Annual Research Report 2018 Annual Research Report 2017 Annual Research Report
  • [Remarks] 全2工程で!あらゆるタンパク質のN末端に薬剤をつなぐ新技術

    • URL

      https://resou.osaka-u.ac.jp/ja/research/2019/20191219_1

    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] トリアゾールを母骨格とした位置特異的N末端修飾剤および位置特異的なタンパク質N末端修飾技術2020

    • Inventor(s)
      林高史、小野田晃、井上望
    • Industrial Property Rights Holder
      林高史、小野田晃、井上望
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Filing Date
      2020
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] タンパク質及び/又はペプチド修飾用分子2019

    • Inventor(s)
      林 高史、小野田 晃、井上 望
    • Industrial Property Rights Holder
      国立大学法人大阪大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Filing Date
      2019
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Overseas
  • [Patent(Industrial Property Rights)] タンパク質及び/又はペプチド修飾用分子2019

    • Inventor(s)
      林 高史、小野田 晃、井上 望
    • Industrial Property Rights Holder
      国立大学法人大阪大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Filing Date
      2019
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] タンパク質及び/又はペプチド修飾用分子2018

    • Inventor(s)
      林 高史、小野田 晃、井上 望
    • Industrial Property Rights Holder
      国立大学法人大阪大学
    • Industrial Property Rights Type
      特許
    • Filing Date
      2018
    • Related Report
      2017 Annual Research Report

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Published: 2017-05-25   Modified: 2024-03-26  

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