細胞外マトリックス蛋白質ｐｏｌｙｄｏｍ／ＳＶＥＰ１の脈管発生寄与機構の解明

• Project/Area Number: 17J40191
• Research Category: Grant-in-Aid for JSPS Fellows
• Allocation Type: Single-year Grants
• Section: 国内
• Research Field: Molecular biology
• Research Institution: Osaka University
• Principal Investigator: 佐藤(西内) 涼子 大阪大学, たんぱく質研究所, 特別研究員(RPD)
• Project Period (FY): 2017-04-26 – 2020-03-31
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2019)
• Budget Amount: ¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000); Fiscal Year 2019: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2018: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000); Fiscal Year 2017: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
• Keywords: 細胞外マトリックス / polydom / リンパ管内皮細胞 / アンジオポエチン / リンパ管発生

Outline of Annual Research Achievements

Polydomはリンパ管発生に重要な細胞外マトリックス(ECM)であり、ノックアウト(KO)マウスは、胎児期に重篤なリンパ浮腫を起こし、出生直後の呼吸不全で死亡する。我々はKOマウスの解析中にpolydomがリンパ管内皮成長因子のアンジオポエチン-2(Ang2)と結合することを見出した。そこで本研究では、polydomとAng2との相互作用機構の解析と、polydomがリンパ管内皮細胞に与える影響を解析を通して、polydomがリンパ管の発生に寄与するメカニズムの解明を目的とした。
平成30年度までに、polydomのN末端から数えて21番目のCCPドメイン(CCP21)に存在する2617番絵のヒスチジンと2619番目のアスパラギン酸がAng2との結合に重要であること、Ang2受容体であるTie2とpolydomは直接結合しないが、Ang2を介して間接的に相互作用することを明らかにしていた。
令和元年度では、polydomが培養ヒトリンパ管内皮細胞(HDLEC)の運動能へ与える影響について、トランスウェルチャンバーを用いた解析を行った。その結果、コラーゲン、フィブロネクチンなど、他のECMを培地に添加した条件でHDLECはほとんど移動しなかったのに対し、polydom存在下では移動細胞数が著しく増加していた。各ECM蛋白質へのHDLECの細胞接着活性を調べたところ、コラーゲン・フィブロネクチンなどと比較して、HDLECはpolydomへの接着活性が弱いことがわかった。また、チャンバーの下面をあらかじめフィブロネクチンでコートしてからウシ血清アルブミンでブロッキングし、培地中のpolydomがチャンバーへ吸着できない状態にしても、細胞移動促進効果は認められた。以上から、polydomはHDLECの接着足場因子としてよりも、走化誘引因子として機能していることが示唆された。

Research Progress Status

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和元年度が最終年度であるため、記入しない。

Research Products

• [Journal Article] Expression of polydom in dermal neurofibroma and surrounding dermis in von Recklinghausen’s disease (2019)
  • Author(s): Kamitani Tomo、Murota Hiroyuki、Arase Noriko、Wataya-Kaneda Mari、Sato-Nishiuchi Ryoko、Sekiguchi Kiyotoshi、Okuzaki Daisuke、Motooka Daisuke、Katayama Ichiro
  • Journal Title: Journal of Dermatological Science Volume: 96 Issue: 2 Pages: 73-80
  • DOI: 10.1016/j.jdermsci.2019.09.005
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] Polydomはリンパ管内皮細胞の遊走活性を促進する (2020)
  • Author(s): 佐藤（西内）涼子、関口清俊
  • Organizer: 第52回日本決法組織学会学術大会
• [Presentation] 細胞外マトリックス蛋白質polydomとリンパ管新生因子アンジオポエチン-2との相互作用メカニズムの解析 (2018)
  • Author(s): 佐藤（西内）涼子、下野知性、諸岡七美、関口清俊
  • Organizer: 第50回日本結合組織学会学術大会