Functional analysis of mutants of EVI1 identified in individuals with radioulnar synostosis with amegakaryocytic thrombocytopenia
| Project/Area Number |
17K10045
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
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| Allocation Type | Multi-year Fund |
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| Section | 一般 |
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| Research Field |
Pediatrics
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| Research Institution | Tohoku University |
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Principal Investigator |
新堀 哲也 東北大学, 医学系研究科, 准教授 (40436134)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
松原 洋一 国立研究開発法人国立成育医療研究センター, 所長室, 研究所長 (00209602)
青木 洋子 東北大学, 医学系研究科, 教授 (80332500)
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| Project Period (FY) |
2017-04-01 – 2020-03-31
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| Project Status |
Granted (Fiscal Year 2018)
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| Budget Amount *help |
¥4,550,000 (Direct Cost: ¥3,500,000、Indirect Cost: ¥1,050,000)
Fiscal Year 2019: ¥910,000 (Direct Cost: ¥700,000、Indirect Cost: ¥210,000)
Fiscal Year 2018: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000)
Fiscal Year 2017: ¥2,860,000 (Direct Cost: ¥2,200,000、Indirect Cost: ¥660,000)
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| Keywords | 血小板減少症 / 橈尺骨癒合症 / MECOM / HOXA11 / EVI1 |
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| Outline of Annual Research Achievements |
血小板減少症を伴う橈尺骨癒合症の患者、血小板減少症等血球異常のみの患者、橈尺骨癒合症のみの患者の検体を収集した。橈尺骨癒合症についても両側、片側、あるいは骨性癒合、線維性癒合など広範な表現型を持つ患者を解析対象とすることができた。検体としては血液のみならず頬粘膜細胞、爪、毛髪も収集した。DNAを抽出し、MECOMおよびHOXA11遺伝子の全エクソンおよび近傍のイントロンの塩基配列決定を行った。また、患者における臨床症状情報については、頻度の高い症状のみならず、これまで見過ごされていた症状の有無にも注目して臨床情報収集を続けている。
また、モデルマウスの解析を行い、遺伝子変異導入個体でのgenotyping方法の確立、および表現型解析を継続した。
ゼブラフィッシュをモデルとする解析を行うため、機器の購入・整備を行い、胚にｍRNAやmorpholinoなどを導入する体制を整えた。Tg(CD41:GFP)（thrombocyteが蛍光標識されるトランスジェニックゼブラフィッシュ）を入手し、その胚に対してMECOMの野生型および変異型RNAを注入し、表現型の観察を継続している。また、mecomを対象としたmorpholinoを設計し、Tg(CD41:GFP)の胚に注入したところ、用量依存性に表現型の変化が観察された。より詳細な観察のための条件検討を継続している。また、CRISPR/Cas9によるmecomのノックアウト個体の作成も行い、genotyping方法の条件検討および表現型観察の条件検討を行っている。さらにF1, F2作成を行っている。
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| Current Status of Research Progress |
Current Status of Research Progress
3: Progress in research has been slightly delayed.
Reason
モデルゼブラフィッシュの作成が確認できるまでに当初の予定よりも時間を要した。
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| Strategy for Future Research Activity |
今後はモデルマウスの解析およびモデルゼブラフィッシュの解析を並行して進めていく予定である。
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Report
(2 results)
Research Products
(4 results)
