Identification and functional analysis of cancer-related microRNA in esophagus cancer

• Project/Area Number: 17K16575
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Research Field: Digestive surgery
• Research Institution: Nagoya City University
• Principal Investigator: 佐本 洋介 名古屋市立大学, 大学院医学研究科, 助教 (30790662)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2019-03-31
• Project Status: Discontinued (Fiscal Year 2018)
• Budget Amount: ¥3,770,000 (Direct Cost: ¥2,900,000、Indirect Cost: ¥870,000); Fiscal Year 2019: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000); Fiscal Year 2018: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000); Fiscal Year 2017: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
• Keywords: 食道癌 / microRNA

Outline of Annual Research Achievements

食道癌は集学的治療が行われているにもかかわらず、高頻度に再発もしくは遠隔転移を起こす予後不良な疾患である。食道癌の新しい治療法及び診断法を開発するためには、詳細なメカニズムを理解することが重要である。我々の教室ではこれまでに食道癌におけるmicroRNA(miRNA)の発現解析を報告してきた。しかしながら、いまだ解析の進んでいないmiRNAは多数ある。これらを踏まえ、下記の研究を行った。
１)食道癌臨床検体におけるmiRNA発現解析。我々の教室ですでに論文発表されている食道癌臨床検体30例における73種類のmiRNA発現プロファイルから候補miRNA(miR-23a、miR-26a、miR-27b、miR-96、miR-128b、miR-129)を同定した。症例数を増やすため臨床検体のcDNAを90例作成し、候補miRNAの発現状況をRT-PCRで再度評価した。miR-96に関しては、発現上昇に伴い生存期間の有意な短縮を認めた。
２）miRNAの発現抑制実験。食道癌細胞株TEシリーズ及びKYSEシリーズのmiR-96の発現状況をRT-PCRで評価した。最も発現の多く見られたKYSE70にmiR-96のinhibitorを導入し発現抑制を、最も発現の少なかったTE-8にmiR-96のmimicを導入して発現促進を行った。RT-PCRで発現抑制もしくは発現促進がなされていることを確認した。miR-96の発現抑制もしくは発現亢進が細胞増殖に与える影響をギムザ染色及びWST-1により評価した。現在のところ細胞増殖には有意な差が見られていない。
３）miR-96の発現抑制もしくは発現亢進が癌細胞の浸潤能及び遊走能に与える影響をcell invasion assayや癌細胞の細胞遊走assayなどで評価した。また、オンラインソフトにて同定されたmiR-96のターゲット遺伝子の機能解析も行った。

Research Products

• [Journal Article] NOTCH1 activates the Wnt/β-catenin signaling pathway in colon cancer (2017)
  • Author(s): Hideyuki Ishiguro、Tomotaka Okubo、Yoshiyuki Kuwabara、Masahiro Kimura、Akira Mitsui、Nobuyoshi Sugito、Ryo Ogawa、Takeyasu Katada、Tatsuya Tanaka、Midori Shiozaki、Koji Mizoguchi、Yosuke Samoto、Yoichi Matsuo、Hiroki Takahashi、Shuji Takiguchi
  • Journal Title: Oncotarget Volume: 36 Pages: 60378-60389
  • Peer Reviewed / Open Access
• [Presentation] 食道癌術後CRPピーク値による合併症予測 (2018)
  • Author(s): 佐本洋介
  • Organizer: 第72回日本食道学会学術集会
• [Presentation] 食道扁平上皮癌(ESCC)におけるmiR-96の発現解析 (2018)
  • Author(s): 中屋誠一、石黒秀行、松尾洋一、高橋広城、坂本宜弘、小川了、田中達也、佐川弘之、大久保友貴、佐本洋介、瀧口修司
  • Organizer: 第14回日本消化管学会総会学術集会
• [Presentation] Expression of miR-96 analysis in esophagus squamous cell carcinoma(ESCC) (2017)
  • Author(s): Yosuke Samoto, Hideyuki Ishiguro, Yoichi Matsuo, Hiroki Takahashi, Nobuhiro Sakamoto, Ryo Ogawa, Tatsuya Tanaka, Hiroyuki Sagawa, Tomotaka Okubo, and Syuji Takiguchi
  • Organizer: 第76回日本癌学会