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乳歯歯髄幹細胞培養上清を用いた放射線性唾液腺障害治療への応用

Research Project

Project/Area Number 17K17210
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

Allocation TypeMulti-year Fund
Research Field Dental engineering/Regenerative dentistry
Research InstitutionKyushu University

Principal Investigator

緒方 謙一  九州大学, 大学病院, 医員 (30778858)

Project Period (FY) 2017-04-01 – 2019-03-31
Project Status Discontinued (Fiscal Year 2018)
Budget Amount *help
¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2018: ¥1,040,000 (Direct Cost: ¥800,000、Indirect Cost: ¥240,000)
Fiscal Year 2017: ¥1,950,000 (Direct Cost: ¥1,500,000、Indirect Cost: ¥450,000)
Keywords幹細胞培養上清 / 歯髄幹細胞 / 抗炎症作用 / 液性因子 / 培養上清 / 放射線性唾液腺障害
Outline of Annual Research Achievements

幹細胞培養上清(CM)としてヒト骨髄由来間葉系幹細胞培養上清(BMMSC-CM)およびヒト歯髄幹細胞培養上清(DPSC-CM)の2種類を用意した。37℃・5%CO2で培養後、80%コンフルエントの状態で培地を無血清DMEMに交換した。48時間後培養上清を回収し、死細胞等を除去するため遠心分離して0.22 μmのフィルターを通して使用した。これら2種のCMをサイトカインアッセイにより網羅的解析を行った。次に、ヒト末梢血単球細胞をヒトT細胞増殖因子であるphytohemagglutinin (PHA)での刺激条件の下、1週間培養した。その後、2日間無血清DMEM、BMMSC-CMおよびDPSC-CM存在下でそれぞれ培養し、活性化T細胞の割合を見るために、フローサイトメトリーにてCD3+CD25+CD69+活性化T細胞の割合を算出した。
サイトカインアッセイから、DPSC-CMはBMMSC-CMと比較すると、抗炎症作用のあるIL-10とIL-13が多く含まれていることがわかった。また、細胞増殖能、血管新生能を有するHepatocyte growth factorはDPSC-CMのみに分泌されていることがわかった。フローサイトメトリーにおいて、PHAで刺激したT細胞がDPSC-CMを加えることで、その割合が著明に低下することがわかった。
以上のことから、DPSC-CMには、BMSC-CMより免疫抑制、細胞増殖および血管新生に働く液性因子が多く含まれ、T細胞の活性化を抑える働きを持つことがわかった。今後は、in vivoにて唾液腺障害モデルマウスにDPSC-CMを投与(静注または局注)し、唾液腺の病理組織像や唾液量の変化などを評価して、DPSC-CMによる新規治療法の開発に繋げたい。

Report

(2 results)
  • 2018 Annual Research Report
  • 2017 Research-status Report
  • Research Products

    (6 results)

All 2018 2017 Other

All Journal Article (3 results) (of which Peer Reviewed: 3 results,  Open Access: 2 results) Presentation (2 results) (of which Int'l Joint Research: 1 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Secretomes of mesenchymal stem cells induce early bone regeneration by accelerating migration of stem cells2018

    • Author(s)
      Ogata Kenichi、Osugi Masashi、Kawai Takamasa、Wakayama Yukiko、Sakaguchi Kohei、Nakamura Seiji、Katagiri Wataru
    • Journal Title

      Journal of Oral and Maxillofacial Surgery, Medicine, and Pathology

      Volume: 印刷中 Issue: 5 Pages: 445-451

    • DOI

      10.1016/j.ajoms.2018.04.002

    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Cytokine mixtures mimicking secretomes from mesenchymal stem cells improve medication-related osteonecrosis of the jaw in a rat model.2018

    • Author(s)
      Ogata K, Matsumura M, Moriyama M, Katagiri W, Hibi H and Nakamura S
    • Journal Title

      JBMR PLUS

      Volume: Vol2 (2) Issue: 2 Pages: 69-80

    • DOI

      10.1002/jbm4.10013

    • Related Report
      2017 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Journal Article] Oral Methotrexate-related Lymphoproliferative Disease Presenting with Severe Osteonecrosis of the Jaw: A Case Report and Literature Review2018

    • Author(s)
      Furukawa S, Oobu K, Moriyama M, Kawano S, Sako S, Hayashida JN, Matsubara R, Ogata KI, Kiyoshima T, Nakamura S.
    • Journal Title

      Internal Medicine

      Volume: 57 Issue: 4 Pages: 575-581

    • DOI

      10.2169/internalmedicine.8946-17

    • NAID

      130006351523

    • ISSN
      0918-2918, 1349-7235
    • Related Report
      2017 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] Secretomes from mesenchymal stem cells participate in the regulation of osteoclastogenesis in vitro2018

    • Author(s)
      K. Ogata, M. Moriyama, M. Matsumura, W. Katagiri, S. Nakamura
    • Organizer
      IADR in London
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
    • Int'l Joint Research
  • [Presentation] 上顎洞と鼻腔に広範囲に進展した上顎粘液線維の1例2017

    • Author(s)
      緒方謙一、川野真太郎、清島保、丸瀬靖之、田中翔一、碇竜也、堀之内康文、中村誠司
    • Organizer
      第62回 日本口腔外科学会総会・学術大会
    • Related Report
      2017 Research-status Report
  • [Remarks] Research Output

    • URL

      https://kyushu-u.pure.elsevier.com/en/publications/secretomes-of-mesenchymal-stem-cells-induce-early-bone-regenerati

    • Related Report
      2018 Annual Research Report

URL: 

Published: 2017-04-28   Modified: 2019-12-27  

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