歯根膜恒常性維持における転写因子Mkxの機能解明

• Project/Area Number: 17K17313
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Multi-year Fund
• Research Field: Orthodontics/Pediatric dentistry
• Research Institution: Tokyo Medical and Dental University
• Principal Investigator: 幸田 直己 東京医科歯科大学, 歯学部附属病院, 医員 (40778908)
• Project Period (FY): 2017-04-01 – 2019-03-31
• Project Status: Discontinued (Fiscal Year 2018)
• Budget Amount: ¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000); Fiscal Year 2020: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000); Fiscal Year 2019: ¥780,000 (Direct Cost: ¥600,000、Indirect Cost: ¥180,000); Fiscal Year 2018: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000); Fiscal Year 2017: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000)
• Keywords: Mkx / Mohawk homeobox / PDL / 歯根膜 / Mohawk / 歯科矯正学 / 転写因子

Outline of Annual Research Achievements

今年度は下記の実験を予定していた。
1. 週齢によるMkx発現量の変化…4週、10週、6か月および12か月齢において野生型マウスを用いて歯根膜のMkx発現量を比較検討。6か月齢以上のマウスに関しては予備実験で安定した結果を得ている凍結粉砕の手法を用いてRNA抽出を行う。マウスの加齢 (に伴う歯根膜の成熟) とMkx発現量の相関関係から近似曲線を作成し、欠損マウスの加齢に伴う表現型発症の理解の一助とする。その後、Mkxのヒトへの応用を見据え、Mkx欠損ラットを用いて矯正力を歯に加える実験を本実験として行う。
2. Mkxと関連遺伝子発現の局在比較…Mkxとの関連が疑われる候補遺伝子について、Mkx欠損マウスの歯根膜の免疫多重染色にてMkxと関連遺伝子各々の発現局在を比較する。Mkx欠損マウスにおけるMkx発現部位の確認は抗GFP抗体を用いて検討 (欠損マウスはMkx遺伝子にGFPをノックインしてMkxの機能を喪失させている)。
3. Mkx欠損ラットを用いた矯正学的歯の移動実験…8週齢の野生型およびMkx欠損ラットの前歯と第一臼歯を矯正用コイルを用いて互いに牽引するように口腔内に接着し両群ラットの歯の移動距離を経日的に14日目まで観察。その後屠殺を行いμCTにて歯の移動様相を解析。組織学的観察および免疫染色による遺伝子発現変動も確認する。

しかしながら、３の実験の予備実験の段階で、ラットの歯の組織学的解析の手法が難しく、時間を要してしまった。また研究代表者の病院退職に伴い、今後の実験の継続が難しくなった。

Research Products

• [Journal Article] Mohawk transcription factor regulates homeostasis of the periodontal ligament (2017)
  • Author(s): Koda N, Sato T, Shinohara M, Ichinose S, Ito Y, Nakamichi R, Kayama T, Kataoka K, Suzuki H, Moriyama K, Asahara H
  • Journal Title: Development Volume: 144 Pages: 313-320
  • DOI: 10.1242/dev.135798
  • Peer Reviewed / Open Access / Int'l Joint Research
• [Presentation] 当分野における10年間の歯科矯正用アンカースクリュー使用状況 (2018)
  • Author(s): 幸田直己、東堀紀尚、松村健二郎、有村恵、秋山秀平、上園将慶、鈴木聖一、森山啓司
  • Organizer: 第77回 日本矯正歯科学会 学術大会
• [Presentation] A case of Angle Class II malocclusion with dental crowding in a growing patient (2018)
  • Author(s): Naoki Koda, Takuya Ogawa and Keiji Moriyama
  • Organizer: APOC 2018 Residents’ Forum
  • Int'l Joint Research
• [Presentation] Stickler症候群患者の口腔内の特徴に関する検討 (2017)
  • Author(s): 木下由紀子、高橋由記、幸田直己、斎藤小百合、宮崎貴行、ピョティハ、辻美千子、小林起穂、森山啓司
  • Organizer: 第76回日本矯正歯科学会学術大会
• [Presentation] Stickler症候群とRobin sequence患者の臨床症状の比較-頭蓋顎顔面形態と全身症状に着目して- (2017)
  • Author(s): 早川大地、幸田直己、高橋由記、姜順花、松本英和、ネイミョミンスイ、辻美千子、小林起穂、森山啓司
  • Organizer: 第76回日本矯正歯科学会学術大会
• [Presentation] 成長終了後に下顎頭肥大を呈したStickler症候群の1症例 (2017)
  • Author(s): 富永千慧、幸田直己、高橋由記、門脇佳緒里、小倉健司、辻美千子、小林起穂、森山啓司
  • Organizer: 第76回日本矯正歯科学会学術大会
• [Presentation] 転写因子Mohawk homeobox (Mkx) の役割 -歯根膜の脈管・神経系の遺伝子発現様相の観点から - (2017)
  • Author(s): 幸田直己、佐藤天平、宮崎貴行、篠原正浩、伊藤義晃、市野瀬志津子、浅原弘嗣、森山啓司
  • Organizer: 第40 回 日本分子生物学会年会 ( Con-Bio 2017 )