扁桃体特異的遺伝子操作マウスの作成と解析

• Project/Area Number: 18022015
• Research Category: Grant-in-Aid for Scientific Research on Priority Areas
• Allocation Type: Single-year Grants
• Review Section: Biological Sciences
• Research Institution: University of Toyama
• Principal Investigator: 森 寿 University of Toyama, 大学院・医学薬学研究部, 教授 (00239617)
• Project Period (FY): 2006 – 2007
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2007)
• Budget Amount: ¥8,600,000 (Direct Cost: ¥8,600,000); Fiscal Year 2007: ¥4,200,000 (Direct Cost: ¥4,200,000); Fiscal Year 2006: ¥4,400,000 (Direct Cost: ¥4,400,000)
• Keywords: 扁桃体 / NMDA受容体 / 情動 / 遺伝子ノックアウトマウス / 遺伝子操作マウス / BAC / Cre

Research Abstract

本研究は、扁桃体神経亜核細胞特異的に遣伝子操作を可能とするC57BL/6近交系の遺伝的背景を持ったマウス系統を樹立し、情動学習における扁桃体亜核のNMDA受容体の機能を解析することを目的とした。特に本研究では、扁桃体内の特定の神経亜核に選択性高く発現することが報告されているGastrin releasing peptide (GRP), LIM homeobox protein 7/8(Lhx7/8), Prolactin receptor (PR)を利用して、遺伝子操作を可能とするマウス系統の樹立を進め、扁桃体の外側核、中心核、内側核においてそれぞれ選択的な発現を示すGRP,Lhx7/8, PRそれぞれの遺伝子座に、誘導型遺伝子組み換え酵素CrePRを挿入したベクターを作成し、C57BL/6由来ES細胞に導入し、3種類とも目的の標的遺伝子組み換えを起こしたES細胞を取得した。得られたES細胞株とICR系統8細胞期胚を用いて、キメラマウスの作製を試み、3種類の標的組換えES細胞すべてからキメラマウスを得、Lhx7/8-CrePR、PR-CrePRでは生殖系列伝達を確認した。
一方、扁桃体の特定神経核でNMDA受容体の機能を阻害するために、脳内で高発現するCAGプロモーター下に、Creの認識配列(loxP)ではさまれたDsRedMST遺伝子と、その下流にチャネル構成M2領域内に点変異を導入したドミナントネガティブ型NMDA受容体サブユニットGluRζ1-N598RとEGFPとの融合遺伝子を接続したベクターを構築し、トランスジェニックマウスを作成しファウンダー候補となる8系統の解析を進めた。このうち1系統で、Cre活性依存的にトランスジーンが発現することを確認した。今後、この系統における誘導型ドミナントネガティブNMDA受容体発現様式の解析を進める。

Research Products

• [Journal Article] Effects of FAK ablation on cerebellar foliation, Bergmann glia positioning and climbing fiber territory on Purkinje cells (2008)
  • Author(s): Watanabe, F., Miyazaki, T., Takeuchi, T., Fukaya, M., Nomura, T., Noguchi, S., Mori, H., Sakimura, K, Watanabe M., Mishina, M
  • Journal Title: Eur. J. Neurosci. 27 Pages: 836-854
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Role of D-serine in the mammalian brain (2007)
  • Author(s): Zhao YL. Mori H.
  • Journal Title: BRAIN and NERVE 59 Pages: 725-730
  • NAID: 40015561877
• [Journal Article] Mouse brain deficient in neuronal PDGF receptor-s develops normally but is vulnerable to injury (2006)
  • Author(s): Ishii, Y., Oya, T., Lianshun, Z., Gao, Z., Kawaguchi, M., Sabit, H., Matsushima, T., Tokunaga, A., Ishizawa, S., Hori, E., Nabeshima, Y., Sasaoka, T., Fujimori, T., Mori, H., Sasahara, M
  • Journal Title: J. Neurochem. 98 Pages: 588-600
• [Journal Article] 情動学習の神経機構(総説) (2006)
  • Author(s): 森 寿
  • Journal Title: 神経研究の進歩 50 Pages: 18-24
• [Presentation] 線条体は弱い恐怖条件付け学習に関与する (2008)
  • Author(s): 岸岡歩、福島章顕、伊藤珠恵、片岡宏隆、森寿、池田敏男、崎村建司、三品昌美
  • Organizer: 第81回日本薬理学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2008-03-17
• [Presentation] 脳においてセリンラセマーゼは神経細胞に存在し、興奮毒性を制御する (2008)
  • Author(s): 宮一志、趙英, らん、本郷和久、宮脇利男、森寿
  • Organizer: 第81回日本薬理学会年会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2008-03-17
• [Presentation] セリンラセマーゼノックアウトマウスを用いた脳内D-セリンの機能解析 (2007)
  • Author(s): 趙英, らん、高田義美、橋本謙二、崎村建司、森寿
  • Organizer: 第30回日本神経科学会大会
  • Place of Presentation: 横浜
  • Year and Date: 2007-09-10
• [Presentation] Study of D-serine function in vivo by establishing and analysis of serine racemase knockout mouse (2007)
  • Author(s): Zhao, Y. L. and Mori, H.
  • Organizer: Neuro2007 Satellite Symposium and The 2nd MCCS-Asia Symposium
  • Place of Presentation: Yokohama
  • Year and Date: 2007-09-08
• [Book] 脳神経科学イラストレイテッド改訂第2版、(分担執筆)序論(p20-41),神経伝達物質と受容体(p197-203) (2006)
  • Author(s): 森 寿
  • Total Pages: 372
  • Publisher: 羊土社
• [Book] ブレインサイエンス・レビュー2006(分担執筆)、p33-47 (2006)
  • Author(s): 森 寿
  • Total Pages: 179
  • Publisher: クバプロ