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生体膜コレステロール組成を感知する蛍光プローブの開発

Research Project

Project/Area Number 18651102
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Living organism molecular science
Research InstitutionGunma University

Principal Investigator

竹内 利行  Gunma University, 生体調節研究所, 教授 (00109977)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 篠塚 和夫  群馬大学, 大学院・工学研究科, 教授 (20206105)
Project Period (FY) 2006 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥3,500,000 (Direct Cost: ¥3,500,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Keywordsコレステロール / ピレン / ダンシル / 発光プローブ / エキシマー効果 / ペリレン / 蛍光プローブ / アクリジンオレンジ / DAMP / ピレン基 / ダンシル基 / 内分泌顆粒
Research Abstract

本研究では,細胞内のコレステロール動態を追跡する蛍光プローブを開発し,コレステロールの機能を可視化して評価する目的で以下の課題を設定した。
課題1)生体膜トラップ型プローブの開発
課題2)酸性環境でエキシマー効果を出す生体膜通過型プローブの開発
課題3)生体膜でリン脂質とコレステロールの会合と解離を測定するプローブの開発
コレステロール本来の性質を保持したプローブとして,dansyl基の付加位置が異なる3種類のdansyl-cholesterolと,ケイ素導入,非導入2種類のpyrene-cholesterolを作成した(特願2007-075414)。Dansyl-cholesterolは親水-疎水環境に応じて蛍光スペクトルが変化し,膜コレステロール含量が少ないと長波長(緑)に,多いと短波長(青)にシフトするので蛍光発色から膜コレステロール含量を推測できることを確認した(特願2007-110515)。更にdansyl-cholesterol(20)は活性化マクロファージで生ずる脂肪滴に輸送されるが,小胞体ERに局在するエステル化酵素ACATのインヒビターSandoz58-035存在下ではその脂肪滴輸送が阻害され,ERに留まる像として観察できた。また,ケイ素を結合させたSi-pyrene-cholesterolは非Si型pyrene-cholesterolに比べて蛍光強度が3倍近く増強した(特願2007-075377)。Pyrene付加コレステロールとpyrene付加リン脂質は会合するとエキシマー効果を呈し,発光波長が長波長側にシフトした。更に,pyreneと同族のperyleneを付加したコレステロールプローブを作成し,このプローブでマクロファージを標識すると,細胞はSi-pyrene-cholesterolよりもさらに強く発光した(特許出願中)。

Report

(2 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • Research Products

    (11 results)

All 2008 2007 2006 Other

All Journal Article (2 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (2 results) Remarks (1 results) Patent(Industrial Property Rights) (6 results)

  • [Journal Article] Sorting mechanism of peptide hormones to secretory granules by the lead of cholesterol-bindingprotenin.secretogranin III in endocrine cells2008

    • Author(s)
      Takeuchi T. and Hosaka. M.
    • Journal Title

      Current Diabetes Rev 4

      Pages: 31-38

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Molecular probes for sensing the cholesterol composition of subcellular organelle membranes.2006

    • Author(s)
      Wang R, Hosaka M, Han L, Yokota-Hashimoto H, Suda M, Mitsushima D, Torii S, Takeuchi T
    • Journal Title

      BBA-Mol Cell Biol Lipids 1761

      Pages: 1169-1181

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Presentation] 癌を探す:新規発光プローブによる癌イメージング2007

    • Author(s)
      穂坂 正博
    • Organizer
      群馬大学生態調節研究所シンポジウム
    • Place of Presentation
      群馬
    • Year and Date
      2007-11-29
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] 生体膜コレステロール組成感知プローブの解析2007

    • Author(s)
      王 蓉
    • Organizer
      分子イメージング学会
    • Place of Presentation
      福井
    • Year and Date
      2007-06-28
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Remarks]

    • URL

      http://imcr.showa.gunma-u.ac.jp/lab/geneanaly/index.html

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 新規蛍光化合物およびそれを用いた細胞内コレステロールの検出方法2007

    • Inventor(s)
      竹内, 他
    • Industrial Property Rights Holder
      群馬大学
    • Filing Date
      2007-04-19
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 酸素濃度測定試薬および酸素濃度測定方法2007

    • Inventor(s)
      竹内, 他
    • Industrial Property Rights Holder
      群馬大学
    • Filing Date
      2007-05-11
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 抗DNP抗体を用いたコレステロール結合剤2007

    • Inventor(s)
      竹内, 他
    • Industrial Property Rights Holder
      群馬大学
    • Filing Date
      2007-08-21
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 新規蛍光化合物およびそれを用いた細胞内コレステロールの検出方法2007

    • Inventor(s)
      竹内, 他
    • Industrial Property Rights Holder
      群馬大学
    • Filing Date
      2007-10-05
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 含ケイ素蛍光化合物および該化合物を用いた蛍光標識剤2007

    • Inventor(s)
      篠塚, 森口, 竹内, 穂坂
    • Industrial Property Rights Holder
      国立大学法人群馬大学
    • Industrial Property Number
      2007-075414
    • Filing Date
      2007-03-30
    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] 含ケイ素蛍光化合物および該化合物を用いた蛍光標識剤2006

    • Inventor(s)
      篠塚, 森口, 竹内, 穂坂
    • Industrial Property Rights Holder
      国立大学法人群馬大学
    • Industrial Property Number
      2006-276757
    • Filing Date
      2006-10-10
    • Related Report
      2006 Annual Research Report

URL: 

Published: 2006-04-01   Modified: 2016-04-21  

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