富山の深層水と八丈島の発光生物群を標的とした生物発光のショットガン的解明の試み
| Project/Area Number |
18651105
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Exploratory Research
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Living organism molecular science
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| Research Institution | Nagoya University |
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Principal Investigator |
大場 裕一 Nagoya University, 生命農学研究科, 助教 (40332704)
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
大塚 攻 広島大学, 生物圏科学研究科, 教授 (00176934)
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| Project Period (FY) |
2006 – 2007
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2007)
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| Budget Amount *help |
¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000)
Fiscal Year 2007: ¥700,000 (Direct Cost: ¥700,000)
Fiscal Year 2006: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
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| Keywords | 富山の深層水 / 八丈島 / 発光生物 / 発現クローニング / ルシフェラーゼ |
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| Research Abstract |
八丈島の発光生物を調査した結果、新たにムネクリイロボタル(Cyphonocerus ruficollis)の生息が確認された。このサンプルを用いて、ホタル上科の分子系統を行い、論文として発表した(Sagegami-Oba et al., 2007)。
八丈島の発光種ニッポンヒラタキノコバエ(Keroplatus nippponicus)からの発光物質の抽出を試みた。その結果、発光はルシフェリンールシフェラーゼ反応ではなく、発光タンパク質であることが示唆された。これは、オーストラリアや北米の発光性キノコバエがルシフェリンールシフェラーゼ反応であることと比べると非常に興味深い。オーストラリア産の種類と18SrRNA遺伝子配列を比較した結果、両者は非常に遠い関係にあることが初めて示唆された。さらに、八丈島にはニッポンヒラタキノコバエと非常に近縁な非発光種が居ることが分かった。分析の結果、これはHeteropterna属の一種であることが判明。新種である可能性があるため、現在詳細を検討中である。ニッポンヒラタキノコバエの発光メカニズムは、この近縁種との比較が重要な手がかりとなるだろう。
簡便な発現クローニング法の確立を目指して、CCDカメラによるポジティブコロニー検出を試みた。その結果、培地中に直接ルシフェリンを加えると安定した発光が検出されることが分かった。これによりコロニーのメンブレンリフティングといった煩雑な操作を行う必要がなくなったため、より効率的なスクリーニングが期待できる。
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Report
(2 results)
Research Products
(5 results)
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[Presentation] 発光生物の進化2007
Author(s)
大場裕一
Organizer
東京大学海洋研究所共同利用研究集会
Place of Presentation
東京大学海洋研究所
Year and Date
2007-11-30
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