| Project/Area Number |
18656241
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Exploratory Research
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Research Field |
Biofunction/Bioprocess
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| Research Institution | Tokyo Institute of Technology |
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Principal Investigator |
丹治 保典 Tokyo Institute of Technology, 大学院・生命理工学研究科, 准教授 (00282848)
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| Project Period (FY) |
2006 – 2007
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2007)
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| Budget Amount *help |
¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000)
Fiscal Year 2007: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,200,000 (Direct Cost: ¥1,200,000)
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| Keywords | 経口ワクチン / バクテリオファージ / サルモネラ / 表層工学 / 大腸菌O157:H7 |
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| Research Abstract |
大腸菌ファージT2頭殻表層に抗原タンパク質を提示したファージワクチンを分子構築し、マウスを用いた動物実験を実施した。研究対象とした抗原タンパク質はSalmonellaの鞭毛タンパク質FliC(H1抗原)とFljB(H2抗原)である。T2ファージ頭殻タンパク質の一つであるSOCをコードするsoc遺伝子下流にβ-galactosidase遺伝子を持つT2βファージは青色のプラークを形成する。FliCとFljBをコードする遺伝子をsoc周辺遺伝子を含むプラスミドに挿入し、これらプラスミドによる形質転換体大腸菌にT2βファージを感染させ、相同組換によりSOCとFliCまたはFljBを共発現するキメラファージ(ワクチン)を分子構築した。これらファージワクチンを用い、以下の実験を行った。実験系(4系列、各系列に6匹のマウスを使用)
A: 非投与群(ネガティブコントロール)
B: 精製タンパク質投与群
C: ファージワクチン投与群
D: ファージワクチンと宿主大腸菌投与群
C,D群では投与したファージワクチンがマウス糞便に検出されたが、投与5日以降は検出されなかった。糞便に含まれる抗原特異的IgA産生量をELISA法により定量した。B,C,D群からFlicとFljB特異的IgA産生が認められ、そのタイターはB、C群で同等だった。ファージ提示型抗原タンパク質量はB群に投与した精製タンパク質量の1%以下であるが、B群と同等の抗体産生能を示したことからファージ提示型抗原がワクチンとして利用できることが示された。
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