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cRNAを使ってゲノムインプリンティング遺伝子の発生ステージ特異的発現を解明する

Research Project

Project/Area Number 18658109
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Applied animal science
Research InstitutionHiroshima University

Principal Investigator

西堀 正英  Hiroshima University, 大学院・生物圏科学研究科, 准教授 (80237718)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 安江 博  独立行政法人農業生物資源研究所, 家畜ゲノム研究ユニット, 上席研究員 (80113497)
Project Period (FY) 2006 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥3,400,000 (Direct Cost: ¥3,400,000)
Fiscal Year 2007: ¥800,000 (Direct Cost: ¥800,000)
Fiscal Year 2006: ¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000)
KeywordsDNAメチル化遺伝子 / リアルタイムPCR / 遺伝子発現 / 脳 / 精巣 / cRNA / 近交系マウス / Dnmt
Research Abstract

近交系マウス(C57BL/6J♂)およびコマーシャル産卵鶏(White Leghorn♂)を用い、脳・肝臓・腎臓・精巣の5つの発生ステージ(胚14日、胚17日、生後1日齢、1週齢、8週齢)ごとに5つのDnmt(Dnmt1/Dnmt2/Dnmt3a/Dnmt3b/Dnmt3L)遺伝子の発現量の変化をマウスおよびニワトリ間で比較しながら調べDNAメチル化酵素関連遺伝子の発現時期、発現場所および発現動態を解析した。解析は、各発生ステージにおける各遺伝子の発現量を、リアルタイムPCRを行い調べた。また、マウスにおけるCGRP遺伝子およびCT遺伝子についても同様に実施し、さらにin situ hybridizationにより発現部位の同定を試みた。(1)Dnmt3L遺伝子がニワトリにはないとの報告があり、このためニワトリDnmt3Lの解析は実施できなかった。(2)Dnmt遺伝子の発現パターンは、肝臓と腎臓では発生および成長に伴って減少する傾向にあったが、脳と精巣ではそのパターンは異なっていた。ニワトリの精巣での発現は肝臓と腎臓のパターンに似て、発生および成長に伴って減少する傾向にあった。(3)ニワトリにはインプリンティング機能が備わっていないとする論文があるが、本研究でニワトリDnmt遺伝子発現が確認でき、その発現量はマウスとほぼ同程度であった。以上から、マウスおよびニワトリにおけるDnmt遺伝子の使われ方が種、臓器間で異なっているものと考えられた。一方、マウスおけるCGRPおよびCT遺伝子の発現は脳で高い傾向にあり、肝臓および心臓では低かった。この結果はこれまでの報告と一致した。これらのcRNAをプローブとしたin situ hybridizationの結果、甲状腺での発現が高く、Sense・Antisense鎖ともに強い発現が観察された。
以上より、遺伝子発現の定量および発現の局在をcRNAプローブを用いることで、これまで明確ではなかったAnti-sense鎖RNAの発現様式を正確に解析できる可能性が広がった。

Report

(2 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • Research Products

    (8 results)

All 2008 2007 2006

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 2 results) Presentation (4 results)

  • [Journal Article] Porcine CRSP1, 2, and 3 genome structures, expressions in tissues, and functions2008

    • Author(s)
      Abdol Hossein Rezaeian
    • Journal Title

      Cytogenetics and Genome Research (印刷中)

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Hormone-induced expression of TACE/ADAM17 protease impacts porcine cumulus cell oocyte complex expansion and meiotic maturation via ligand activation of the EGF2007

    • Author(s)
      Yasuhisa Yamashita
    • Journal Title

      Endocrinology 148

      Pages: 6164-6175

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Changes in the expression of gallinacins, antimicrobial peptides, in ovarian follicles during follicular growth and in response to lipopolysaccharide in laying hens (Gallus domesticus).2007

    • Author(s)
      Kalpana Subedi
    • Journal Title

      Reproduction 133・1

      Pages: 127-133

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Genomic structure of swine taste receptor family 1 member 3, TAS1R3, and its expression in tissues.2006

    • Author(s)
      Kiuchi Sachiko
    • Journal Title

      Cytogenetics and Genome Research 115・1

      Pages: 51-61

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Presentation] 胚発生・成長に伴うマウスおよびニワトリにおけるDNAメチル化酵素遺伝子の発現動態2007

    • Author(s)
      礒兼 妙子
    • Organizer
      日本動物遺伝育種学会第8回大会
    • Place of Presentation
      つくば国際会議場
    • Year and Date
      2007-11-24
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] in situハイブリダイゼーション用遺伝子プローブ配列を基軸としたウシのオリゴアレイの検出2007

    • Author(s)
      庄條 昌之
    • Organizer
      日本動物遺伝育種学会第8回大会
    • Place of Presentation
      つくば国際会議場
    • Year and Date
      2007-11-24
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] ニワトリにおけるDNAメチル化酵素関連遺伝子の発現解析2007

    • Author(s)
      礒兼 妙子
    • Organizer
      日本家禽学会2007年秋季大会
    • Place of Presentation
      岡山大学
    • Year and Date
      2007-09-29
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] 胚発生および成長に伴うDNAメチル化酵素遺伝子の発現様式の解析2007

    • Author(s)
      礒兼 妙子
    • Organizer
      第108回日本畜産学会岡山大会
    • Place of Presentation
      岡山大学
    • Year and Date
      2007-09-26
    • Related Report
      2007 Annual Research Report

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Published: 2006-04-01   Modified: 2016-04-21  

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