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6型蛋白分泌装置OMVを利用した0157コンポーネントワクチン開発に関する研究

Research Project

Project/Area Number 18659123
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Bacteriology (including Mycology)
Research InstitutionChiba University

Principal Investigator

山本 友子  Chiba University, 大学院・薬学研究院, 教授 (60110342)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 高屋 明子  千葉大学, 大学院・薬学研究院, 講師 (80334217)
Project Period (FY) 2006 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
Fiscal Year 2006: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
Keywords感染症 / 細菌 / ワクチン / 遺伝子 / OMV / O157 / 病原性
Research Abstract

我々はOuter membrane vesicle(OMV)を6型分泌装置として位置づけ,細菌蛋白の宿主標的細胞へのデリバリーシステムとしての機能について研究を行ってきた。一方,我々は,腸管出血性大腸菌O157:H7の病原性発現に関する研究を展開してきているが,その中でClpXPが本菌の腸管付着に関連するIII型蛋白分泌システムの発現調節に関わることを見出した。
昨年度の研究で,O157:H7のOMVの産生条件を検討し,AAA+ protease memberであるClpXPの欠損株が大量のOMVを産生することを明らかにした。そこで本年度は,OMVを利用したO157OMVコンポーネントワクチンの構築を目的として,OMVによるO157:H7の毒素のデリバリーの可能性について検討し以下の事柄を明らかにした。
1.大腸菌O157:H7の毒素Stx1/2の特異抗体を用いて,Western blottingを行い,両毒素の分泌量を検討した結果,それらの分泌量はClpXP欠損によって,顕著に増加することが明らかとなった。
2.OMVを大量に産生するClpXP変異株よりOMVを精製し,電子顕微鏡解析,生化学的解析を行った。その結果,精製したOMVfractionにはO157:H7の毒素Stx1/2が含まれることが明かとなった。さらにVero細胞に精製したOMVを接種したところ,細胞毒性が観察された。
これらの結果は両毒素がOMVによって宿主細胞へ輸送される可能性を強く示唆している。無毒型のSTx1,Stx2を用いて,OMVのコンポーネントワクチン構築をさらに進める意義を見出すことができた。

Report

(2 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • Research Products

    (8 results)

All 2008 2007 2006 Other

All Journal Article (5 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (1 results) Book (1 results) Remarks (1 results)

  • [Journal Article] Coordinated regulation of expression of Salmonella pathogenicity island l and flagellar type III secretion systems by ATP-dependent ClpXP protease.2008

    • Author(s)
      Kage, H, Takaya, A, Ohya, M, and Yamamoto, T
    • Journal Title

      Journal of Bacteriology 190

      Pages: 2470-2478

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] An oral Salmonella vaccine promotes the down-regulation of cell surfaces Toll-like recetor 4(TLR4)and TLR2 expression in mice.2007

    • Author(s)
      Eguchi, M, Sekiya, Y, Suzuki, M, Yamamoto, T and Matsui H
    • Journal Title

      FEMS Immunol. Med. Microbiol. 50

      Pages: 300-308

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Expressed Salmonella antigens within macrophages enhance the proliferation of CD4+ and CD8+ T Iymphocytes by means of bystander dendritic cells.2007

    • Author(s)
      Eguchi, M, Sekiya, Y, Kikuchi, Y, Takaya, A, Yamamoto, T and Matsui H
    • Journal Title

      FEMS Immunol.Med.Microbiol。 50

      Pages: 411-420

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Organization of Tn2610 containing two transposition modules2006

    • Author(s)
      A.Takaya, M.Watanabe, T.Yamamoto
    • Journal Title

      Antimicrobial Agents and Chemotherapy 50

      Pages: 1143-1147

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] The DnaK chaperone machinery converts the native FlhD2C2 hetero-tetramer into a functional transcriptional regulator of flagellar regulon expression in Salmonella.2006

    • Author(s)
      A.Takaya, M.Matsui, T.Tomoyasu, M.Kaya, T.Yamamoto
    • Journal Title

      Molecular Microbiology 59

      Pages: 1327-1340

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Presentation] Quorum sensing in Pseudomollas aerugihosa is regulated by Lon protease.Abstraets,Cirencester,England.(2007)2007

    • Author(s)
      Yamamoto T
    • Organizer
      International Conference on AAA Proteins
    • Place of Presentation
      Cirencester,England
    • Year and Date
      2007-09-10
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Book] 薬科微生物学2007

    • Author(s)
      山本 友子
    • Total Pages
      318
    • Publisher
      丸善株式会社
    • Related Report
      2007 Annual Research Report 2006 Annual Research Report
  • [Remarks]

    • URL

      http://www.p.chiba-u.ac.jp/lab/bisei/index.html

    • Related Report
      2007 Annual Research Report

URL: 

Published: 2006-04-01   Modified: 2016-04-21  

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