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B型肝炎ウイルスS粒子形成能を利用した異種蛋白のS粒子表面上での発現と応用

Research Project

Project/Area Number 18659130
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Virology
Research InstitutionHamamatsu University School of Medicine

Principal Investigator

上田 啓次  Hamamatsu University School of Medicine, 医学部, 教授 (00221797)

Project Period (FY) 2006 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
KeywordsHBs / 粒子形成 / 異種蛋白 / ワクチン創成 / 万能型 / HBV / ワクチン
Research Abstract

B型肝炎ウイルス(HBV)のHBs蛋白はひじょうに効率よく分泌され粒子を形成することが知られている。本性質を利用し粒子表面上に異種蛋白を発現し様々な抗原に対応可能な万能型ワクチン創成技術開発へ応用することを考案した。このようなことが実際可能かどうかを確認するため異種蛋白としてはヒスチジンヘキサマー-Express(His6-Exp)タグを用いて,分泌シグナルが存在するとされるHBsN末約20アミノ酸を残しその後に続く親水性部分に挿入するタイプや単純にN末に融合させるタイプなどのうち,どのような構築が最適か更なる検討を培養細胞系で検討した。その結果HBsのORFの5'に単純に融合する(His6-Exp-HBs)ことが最適であることが解った。本発現ベクターを培養細胞へトランスフェクションし一過性発現系及び安定発現系にて培養上清を回収した。培養上清中に分泌されたHis6-Exp-HBs蛋白がNiNTA(His6アフィニティー担体)アガロースで回収・濃縮されることを確認した。更にスークロース密度勾配遠心で比重1.15〜1.18g/m1に集積することを確認した。これらの結果はHis6-Exp-HBsが粒子を形成していることを示している。
粒子形成能を更に具体的に示すため電顕レベルでの粒子の証明,免疫原性を証明するためのマウスへの接種実験が進行中である

Report

(2 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • Research Products

    (5 results)

All 2008 2006

All Journal Article (4 results) Patent(Industrial Property Rights) (1 results)

  • [Journal Article] KSHV RTA induces a transcriptional repressor, HEY1 that represses rta promoter.2006

    • Author(s)
      Yada, K., Do, E., Sakakibara, S., Ohsaki, E., Ito, E., Watanabe, S., Ueda, K.
    • Journal Title

      Biochem, Biophys. Res. Comm. 345

      Pages: 410-418

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Lack of a Mechanism of Faithful Partition and Maintenance for the KSHV Genome.2006

    • Author(s)
      Ueda, K., Sakakibara, S., Ohsaki, E., Yada, K.
    • Journal Title

      Virus Research 122

      Pages: 85-94

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] KSHVの遺伝子とその産物.ヘルペスウイルス学-基礎・臨床研究の進歩2006

    • Author(s)
      矢田佳織, 大崎恵理子, 上田啓次
    • Journal Title

      日本臨床 64

      Pages: 538-542

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] KSHVの潜伏感染と再活性化機構.ヘルペスウイルス学-基礎・臨床研究の進歩-2006

    • Author(s)
      大崎恵理子, 矢田佳織, 上田啓次
    • Journal Title

      日本臨床 64

      Pages: 589-593

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Patent(Industrial Property Rights)] HBsペプチド融合体2008

    • Inventor(s)
      上田 啓次
    • Industrial Property Rights Holder
      浜松医科大学
    • Industrial Property Number
      2008-063642
    • Filing Date
      2008-03-13
    • Related Report
      2007 Annual Research Report

URL: 

Published: 2006-04-01   Modified: 2016-04-21  

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