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緑色脂肪トランスジェニックマウスの開発

Research Project

Project/Area Number 18659529
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Plastic surgery
Research InstitutionNippon Medical School

Principal Investigator

百束 比古  Nippon Medical School, 大学院・医学研究科, 教授 (00165135)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 水野 博司  日本医科大学, 医学部, 准教授 (80343606)
大木 更一郎  日本医科大学, 医学部, 講師 (90291715)
小川 令  日本医科大学, 医学部, 講師 (70398866)
Project Period (FY) 2006 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥3,200,000 (Direct Cost: ¥3,200,000)
Fiscal Year 2007: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2006: ¥2,300,000 (Direct Cost: ¥2,300,000)
Keywords再生医学 / トランスジェニック動物 / 脂肪 / GFP / トランスジェニックマウス / 遺伝子導入
Research Abstract

前年度同様、マウス由来aP2プロモーターにEGFP遺伝子を連結させ、脂肪細胞特異的にGFP蛋白を発現させたaP2/EGFPトランスジェニック(Tg)マウスの作成を目的とする。aP2プロモーターは、当該のDNA配列が挿入されたpBS/aP2 vectorを入手し、これを用いる。pBS/aP2ベクターのaP2プロモーター下流へpEGFP-N1 vectorから制限酵素切断により切り出したEGFP遺伝子断片を挿入し、これをTgベクターとする。本ベクターを用い、C57BL/6J.Jcl(B6)マウス前核期受精卵へのinjectionによりTgマウスを作出し、導入遺伝子のDNA検査およびタンパクの発現検査を行い、陽性個体が得られるかを確認する。
まずpEGFP-N1 vectorを用い、SmaI,NotI酵素切断によりEGFP断片746bpの切り出しを行った。そしてgel extractionkitを用い、アガロースゲルからEGFP DNA断片を抽出した。最後にpBS/aP2 vectorについてもpEGFP-N1 vectorと同様にSmaI, NotI酵素切断の後に切り出しと抽出を行った。
その結果、NotI-SmaI酵素切断により、ピックアップした3クローンすべてにおいて746bpのEGFP断片の挿入が認められた。この結果からEGFP遺伝子がpBS/aP2ベクターへ正しく挿入されていることが示された。

Report

(2 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report

URL: 

Published: 2006-04-01   Modified: 2016-04-21  

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