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歯胚サイドポピュレーション細胞(エスビー細胞)による歯の再生技術の確立

Research Project

Project/Area Number 18659592
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Surgical dentistry
Research InstitutionThe University of Tokyo

Principal Investigator

本田 雅規  The University of Tokyo, 医科学研究所, 寄付研究部門教員 (70361623)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 朝比奈 泉  長崎大学, 大学院・医歯薬総合研究科, 教授 (30221039)
渡辺 信和  東京大学, 医科学研究所, 特任助教 (10334278)
Project Period (FY) 2006 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
KeywordsSP細胞 / 幹細胞 / 歯髄 / 再生 / 上皮間葉相互作用 / 歯胚細胞 / ヒト歯髄組織 / ABCG2 / Hoechst33342 / RT-PCR
Research Abstract

本年度は歯胚組織から単離したSP細胞が歯の組織再生に有用であることを検討したが、残念ながら、SP細胞とMP細胞において有意な差は得られなかった。
はじめに、歯胚組織から単離したSP細胞群とメインポピュレーション細胞群(MP細胞)をin vitro(Int, End. Journal2007)およびin vivoにおいて比較・解析した。in vitroにおける実験は、SP細胞群とMP細胞群をFACSにてソーティングした後に歯胚上皮細胞と共培養しALP活性の比較・解析を行ったが、有意差は得られなかった。歯関連遺伝子群に関してもRT-PCR法を用いて比較解析を行ったが、著名な差は得られなかった。次に、in vivoの移植実験による歯の再生能の評価をおこなった。ソーティングしたSP細胞とMP細胞を培養して増殖させた後に、歯胚上皮細胞と担体の中で再度組み合わせた。これらのSP細胞とMP細胞を組み合わせた担体を、ヌードラットの腹部大網に移植した。再生組織の評価は、過去の研究結果において、培養歯胚上皮細胞との組むあわせ移植により、移植4週後にエナメル質が再生することから(Cell transplantation 2007)、移植4週後に再生組織を取り出し、組織化学的および免疫組織化学的に評価することを予定レた。しかし、移植後取り出した移植体は1-2mmと小さく、かっ、肉眼的に硬組織形成が認められなかった。また、組織学的に観察したが、硬組織形成は確認できなかった。そこで、培養したSP細胞とMP細胞群をさらに、SP細胞とMP細胞にソーティングで分けることを試みたが、培養・継代するとSP細胞の存在が確認できなかった。したがって、SP細胞は単離した歯髄組織内には存在するものの、継代培養すると、その形質を喪失することが示唆された。さらに、移植にはある程度の細胞数が必要であり、歯髄組織内に移植必要SP細胞が存在しないことから、今回の実験においてSP細胞の歯の形成能を評価することは困難であった。

Report

(2 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • Research Products

    (8 results)

All 2008 2007 Other

All Journal Article (6 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (1 results) Book (1 results)

  • [Journal Article] Collagen type I matrix affects the molecular and cellular behavior or Purified porcine dental follicle cells2008

    • Author(s)
      Tsuchiya S, Honda M, et. al.
    • Journal Title

      Cell&Tissue Research 331

      Pages: 447-459

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Side population cells expressing ABCG2 in human dental pulp tissue2007

    • Author(s)
      Honda M, Nakashima F, et. al.
    • Journal Title

      International Endodontic Journal 40

      Pages: 949-958

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Subcultured odontogenic epithelial cells in combination with dental mesenchymal cells produce enamel-dentin-like complex structures2007

    • Author(s)
      Honda M, Shinohara Y, et. al.
    • Journal Title

      Cell Transplantation 16

      Pages: 833-847

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] The sequential seeding of epithelial and mesenchymal cells for tissue-engineered tooth regeneration2007

    • Author(s)
      Honda MJ, Tsuchiya S, Sumita Y, Sagara H, Ueda M
    • Journal Title

      Biomaterials 28

      Pages: 680-689

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Side population cells expressing ABCG2 in human adult dental pulp tissue

    • Author(s)
      Honda.M, Nakashima F, Satomura K, Shinohara Y et al.
    • Journal Title

      International Endodontic Journal (in press)

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Subcultured odontogenic epithelial cells in combination with dental mesenchymal cells produce enamel-dentin-like complexes structures

    • Author(s)
      Honda, MJ, Shinohara Y, Hata KI, Ueda M
    • Journal Title

      Cell Transplantation (in press)

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Presentation] Reconstruction of tooth tissue2007

    • Author(s)
      Honda Masaki
    • Organizer
      9th International Conference on Tooth Morphogenesis and Differentiation
    • Place of Presentation
      Zurich,Swiss
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Book] 再生医療技術の最前線(バイオテクノロジーシリーズ)2007

    • Author(s)
      本田雅規・上田実
    • Total Pages
      281
    • Publisher
      シーエムシー出版
    • Related Report
      2007 Annual Research Report

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Published: 2006-04-01   Modified: 2016-04-21  

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