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エンヴェロープベクターとsiRNAを応用した歯周組織再生療法

Research Project

Project/Area Number 18659621
Research Category

Grant-in-Aid for Exploratory Research

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Periodontal dentistry
Research InstitutionTokyo Medical and Dental University

Principal Investigator

近藤 尚知  Tokyo Medical and Dental University, 大学院・医歯学総合研究科, 助教 (70343150)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 春日井 昇平  東京医科歯科大学, 大学院・医歯学総合研究科, 教授 (70161049)
黒田 真司  東京医科歯科大学, 歯学部附属病院, 助教 (50323689)
Project Period (FY) 2006 – 2008
Project Status Completed (Fiscal Year 2008)
Budget Amount *help
¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000)
Fiscal Year 2008: ¥600,000 (Direct Cost: ¥600,000)
Fiscal Year 2007: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,800,000 (Direct Cost: ¥1,800,000)
Keywordsエンヴェロープベクター / siRN / Direct in vivo gene transfer / 骨組織 / 再生 / 遺伝子 / 燐酸カルシウム法 / リポフェクタミン法 / 遺伝子導入 / セメント質 / 歯根膜 / ヘルトビッヒ / 抜歯窩 / ヘルトビッヒ上皮鞘
Research Abstract

本研究は、エンヴェロープベクターの併用によりsiRNAを効率よく遺伝子導入することを目的としたもので、ウィルスの内容物を不活化して膜相当部のみを使用するエンヴェロープベクターは、導入効率の高さは維持したまま、ウィルスベクターの危険因子を排除した画期的な遺伝子導入ツールであると考えていた。上記の手法により、安全性の向上とともに、遺伝子導入のさらなる効率化を図ることが可能となると思われていた。しかしながら、エンヴェロープベクターの導入効果を検証するために、BMP-2をエンヴェロープベクターに包括し、下顎抜歯窩に導入し、その効果を抜歯窩の治癒すなわち骨再生を観察することで評価したところ、必ずしも肯定的な結果が得られなかった。軟エックス線写真、マイクロCTなどのエックス線検査により評価をしたところ、実験群とコントロール群間において必ずしも有意な差を認めなかった。したがって、エンヴェロープベクターの導入効率を再評価するため、培養細胞を用いて、その導入効率を既存の遺伝子導入法である、燐酸カルシウム法、リポフェクタミン法と比較検討した。その結果、エンヴェロープヴェクターの導入効率は他の方法よりも高くなく、むしろ低かった。これらの結果から、エンヴェロープヴェクターの使用による遺伝子導入は、必ずしも効果的でないことが示唆されたため、遺伝子導入の方法から見直しを図り、生体に直接遺伝子を導入する試薬としてIn vivo JET PEIを用いたDirect in vivo gene transferを試みた。本試薬を使用した実験として、骨欠損部にBMP-2の遺伝子導入を行なった。ラットの頭頂骨に直径5mmの骨欠損を形成し、In vivo JET PEIと伴にGFPの遺伝子を単純に注射することで、その遺伝子が周囲組織に導入されることを蛍光顕微鏡によって観察した。同様に、BMP-2の遺伝子を注射したところ、マイクロCTによる評価において、術後早期の段階における骨組織の再生促進が認められた。本研究の結果から、Direct in vivo gene transferの有用性が示唆された。

Report

(3 results)
  • 2008 Annual Research Report
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • Research Products

    (11 results)

All 2008 2006

All Journal Article (8 results) (of which Peer Reviewed: 6 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Hydroxyapatite fiber material with BMP-2 gene induces ectopic bone formation.2008

    • Author(s)
      Oda M, Kuroda S, Kondo H, Kasugai s.
    • Journal Title

      Journal of B iomedical Materials Research [Epub aheadof print]

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Comparative analysis of gene expression by cDNA microarray between cementoblasts and periodontal 1igament cells in the murine mandible.2008

    • Author(s)
      Y Yokoyama, T Damrongrungruang, S Kuroda, Y Takano, K Ohya, S Kasugai, H Kondo
    • Journal Title

      The Journal of Oral Bioscience 50 (3)

      Pages: 183-193

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Bone morphogenetic protein-2 (BMP-2)and vascular endothe1ial growth factor (VEGF)transfection to human periosteal cellS enhances OSteoblast differentiation and bone formation.2008

    • Author(s)
      Samee M, Kasugai S, Kondo H, Ohya K, Shimokawa H, Kuroda s.
    • Journal Title

      Journal of Pharmacol Science 108 (1)

      Pages: 18-31

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Relevance of resonance frequency analysis to evaluate dentalimplant stability : simulation and histomorphometrical animal experiments.2008

    • Author(s)
      Yoshihiro Ito, Daisuke Sato, Satoshi Yoneda, Daisuke lto, Hisa tomo Kondo, ShoheiKasugai.
    • Journal Title

      Clnical Oral Implants Research 19(1)

      Pages: 9-14

    • Related Report
      2008 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] レーサーキャプチャー顕微鏡を用いたマウス・セメント芽細胞および歯根膜細胞にお ける遺伝子発現の比較検討2008

    • Author(s)
      横山佳子(指導:近藤尚知、春日井昇平)
    • Journal Title

      口腔病学会雑誌 75(1)

      Pages: 13-28

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Comparative analysis of gene expression by cDNA microarray between cementoblasts and periodontal ligament cells in the murine mandible2008

    • Author(s)
      Yoshiko Yokoyama, Shinji Kuroda, Teerasak Damrongrungruang, Yoshiro Takano, Keiichi Ohya, Shohei Kasugai and Hisatomo Kondo
    • Journal Title

      The Journal of Oral Bioscience (In press)

    • NAID

      10027104050

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Bone Regeneration by Modified Gene-Activated Matrix; Effectiveness in Segmental Tibial Defects in Rats.2006

    • Author(s)
      Masaki Endo, Shinji Kuroda, Hisatomo Kondo, et al.
    • Journal Title

      Tissue Engineering 12(3)

      Pages: 489-497

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Effects of exposure to 4-META/MMA-TBB resin on pulp cell viability.2006

    • Author(s)
      Imaizumi N, Kondo H, Ohya K, Kasugai S, Araki K, Kurosaki N.
    • Journal Title

      Journal of Medical and Dental Science 53(2)

      Pages: 127-133

    • NAID

      110004699877

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Presentation] 歯周組織、顎骨の再生に関する研究(分子生物学的アプローチ)2008

    • Author(s)
      近藤尚知
    • Organizer
      再生補綴医学研究会第一回学術会議
    • Place of Presentation
      名古屋
    • Year and Date
      2008-11-28
    • Related Report
      2008 Annual Research Report
  • [Presentation] Comparative Analysis of Gene Expression between Cementum and Periodontal Ligament2008

    • Author(s)
      近藤尚知
    • Organizer
      International Association for Dental Research
    • Place of Presentation
      Toronto
    • Year and Date
      2008-07-03
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] Comparative Analys is of Gene Expression between Cementumand Periodontal Ligament2008

    • Author(s)
      H. KONDO. Y. YOKOYAMA, Y. DATE, DAMRONGRUNGRUANG, M. 0DA, S. KURODA, S. ISEKI, K. OHYA, S. KASUGAI
    • Organizer
      86th IADR General Sess ion
    • Place of Presentation
      Toronto
    • Related Report
      2008 Annual Research Report

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Published: 2006-04-01   Modified: 2016-04-21  

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