抗癌剤応答性ペプチドフィンガープリンティングによる癌治療効果のモニタリング

• Project/Area Number: 18700440
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Medical systems
• Research Institution: Sapporo Medical University
• Principal Investigator: 苗代 康可 Sapporo Medical University, 医学部, 助教 (80347161)
• Project Period (FY): 2006 – 2007
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2007)
• Budget Amount: ¥3,600,000 (Direct Cost: ¥3,600,000); Fiscal Year 2007: ¥1,600,000 (Direct Cost: ¥1,600,000); Fiscal Year 2006: ¥2,000,000 (Direct Cost: ¥2,000,000)
• Keywords: proteomic / peptidome / fingerprint / 抗癌剤治療モデル / 血漿 / 培養上清 / SELDI-TOF MS / 検査・診断システム / proteomics

Research Abstract

1.細胞培養上清からの治療応答性ペプチドームの同定抗がん剤抵抗性がん細胞および抗癌剤感受性細胞をDocetaxel 100nM存在下および非存在下で48時間培養し,細胞培養上清をSELDI-TOFMSにより解析した。Protein chipはCM10(陽イオン交換chip),1MAC-Cu(金属親和性chipに銅を固定),IMAC-Ni(金属親和性chipにニッケルを固定)を使用した。CM10においては感受性細胞のみでDocetaxel投与後上昇および低下するpeakを,IMAC-Cuにおいては感受性細胞でのみ発現上昇するpeakを,IMAC-Niにおいては感受性細胞でのみDocetaxel投与後上昇および減少するpeakおよび抵抗性細胞でのみ発現上昇するpeakを検出し,それらのpeakを同定した。
2.in vivoにおける治療応答性ペプチドームの同定in vivoにおけるがん治療のモデル系として,親株(HCT116)とHCT116-CHFRをそれぞれヌードマウスの鼠径部皮下に移植し,腫瘍径が1cmの時点からDocetaxelを投与し,治療後7日目で腹部大動脈から採血した。腫瘍は抗癌剤感受性株移植群において優位に縮小した。各群から取得した血漿はアルブミン除去後,フェニルカラムにより分画しAu chipをもちいてSELDI-TOF MS解析した。その結果,治療有効性(Docetaxel反応性)の指標となり得るpeakを再現性をもって検出し,それらのpeakを同定した。
3.臨床例を用いた治療効果判定の検討。
癌患者から抗癌剤投与前後の血清を経時的に採取し質量分析器(SELDI-TOF MS)でハイスループットに分析し,前年度の結果を参考に抗癌剤に反応し発現または消失するchemo-responsivefingerprintsをヒト血漿中から同定した。現在chemo-responsive fingerprintsと種々の臨床データと比較し,本研究による結果の有用性と適切性を検討中である。