細胞骨格・膜のダイナミズムにおけるSWAP-70の役割

• Project/Area Number: 18780069
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Applied biochemistry
• Research Institution: The University of Tokyo
• Principal Investigator: 伊原 さよ子 The University of Tokyo, 大学院・農学生命科学研究科, 助教 (80292788)
• Project Period (FY): 2006 – 2007
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2007)
• Budget Amount: ¥3,300,000 (Direct Cost: ¥3,300,000); Fiscal Year 2007: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000); Fiscal Year 2006: ¥1,900,000 (Direct Cost: ¥1,900,000)
• Keywords: 細胞骨格 / 細胞膜 / アクチン

Research Abstract

細胞は刺激を受けた際"ラッフリング"という細胞膜辺縁部が波状に動く現象を呈する。この現象は細胞膜と細胞骨格による協調的なはたらきの一例としてとらえることもできるが、その分子機構は明らかとなっていない。SWAP-70はこの"ラッフリング"に必要であることが示されているため、細胞膜と細胞骨格のなかだちとしての役割を果たしていることが予想される。本研究はその具体的な機構を解明することを目的としており、本年度は主として、細胞膜の動きに関わりがあるとされる分子とSWAP-70との結合の可能性について検討をおこなった。いくつかの候補分子についてflagタグ付き融合タンパク質として細胞に発現させ、抗SWAP-70抗体による免疫沈降により結合の可能性について検討した。その結果、unconventional myosinの一種とSWAP-70との共沈が検出された。また、細胞を刺激した際に、ラッフリング部位において両者の共局在が観察された。これまでの研究からSWAP-70はそのC末端にアクチン結合部位をもつことが明らかとなっているが、myosinとの共沈および共局在はアクチン結合部位を欠失したSWAP-70の変異体を用いた場合でも観察されたことから、SWAP-70はアクチンとは独立にmyosinと結合している可能性が高いと考えられる。これまでにunconventional myosinは膜の動き、形態変化に関与しているとの報告もあることから、両者の結合がSWAP-70の役割に重要な意義を持つ可能性が考えられる。

Research Products

• [Journal Article] SWAP-70 is important for invasive phenotypes of mouse embryo fibroblasts transformed by v-Src (2008)
  • Author(s): Murugan, AK., et. al.
  • Journal Title: IUBMB Life 60 Pages: 236-240
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Identification of DOCK4 and its splicing variant as PIP3 binding proteins (2008)
  • Author(s): Kanai, A., et. al.
  • Journal Title: IUBMB Life (in press)(掲載確定)
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Pleckstrin-2 selectively interacts with phosphatidylinositol 3-kinase lipidproducts and regulates actin organization and cellspreading (2007)
  • Author(s): Hamaguchi, N., et. al.
  • Journal Title: Biochemical and Biophysical Research Communications 361 Pages: 270-275
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Cooperation of DEF6 with activated Rac in regulating cell morphology (2007)
  • Author(s): Oka, T.et al.
  • Journal Title: Journal of Biological Chemistry 282 Pages: 2011-2018
• [Journal Article] SWAP-70 is required for oncogenic transformation by v-Src in mouse embryo fibroblasts (2007)
  • Author(s): Fukui, Y.et al.
  • Journal Title: Biochemical and Biophysical Research Communications 356 Pages: 512-516
• [Journal Article] Mutational analysis on the function of the SWAP-70 PH domain (2006)
  • Author(s): Wakamatsu, I.et al.
  • Journal Title: Molecular and Cellular Biochemistry 293 Pages: 137-145
• [Journal Article] Activity of β3-β4 loop of the PH domain is required for the membrane targeting of SWAP-70
  • Author(s): Fukui, Y.et al.
  • Journal Title: IUBMB Life (in press)