幹細胞移植モザイク作成による上肢先天異常の治療

• Project/Area Number: 18791035
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (B)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: Orthopaedic surgery
• Research Institution: Nagoya University
• Principal Investigator: 建部 将広 Nagoya University, 医学部・附属病院, 助教 (60420379)
• Project Period (FY): 2006 – 2007
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2007)
• Budget Amount: ¥3,500,000 (Direct Cost: ¥3,500,000); Fiscal Year 2007: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000); Fiscal Year 2006: ¥2,500,000 (Direct Cost: ¥2,500,000)
• Keywords: mosaicism / 幹細胞 / 凝集法 / 先天異常

Research Abstract

GFP導入マウスより通常の方法にて体外受精を施行し、受精卵を作成した。作成した受精卵に凝集法を用いて幹細胞(幹細胞については現在市販されているマウスのES細胞を培養し使用)を導入することでmosaicismを作成した。子宮内に移植して妊娠させ、出産させた個体について、導入した細胞の確認・分布について蛍光顕微鏡を用いて確認。出生した個体は精巣・卵巣を含む全身に導入した細胞の確認が出来ていた。ついでGFP導入マウスのES細胞を樹立し、これを用いて通常のマウスの受精卵とのmosaicismの作成を試みた。集合胚は作成されるものの、マウス子宮内へ移植した後の妊娠の継続がされなかった。また、中胚葉性幹細胞(MSC)についてはマウス大腿骨より分離・培養した細胞を用いてmosaicismの作成を試みた。しかし、これについても集合胚は得られるものの妊娠の継続が不能であった。両者ともに集合胚は確認されており、mosaicismの作成・子宮内への移植は同様の方法で行っており、細胞レベル等何らかの障害が発生し妊娠の継続がえられなかったと考えられた。
先天異常モデルマウスについてはC57BL6 Hm+系統(合指・合趾症モデルのマウス)のマウスを導入した。受精卵を採取し、この系統のマウスに対してのmosaicismを作成することにより先天異常の発生を防ぐことを試みた。このマウスを繁殖させ、仔の四肢に幹細胞(C57BL6/EGFP系統:ES細胞・MSC)を注入し、細胞の生着および組織への分化を確認している。今後はこの結果を踏まえて論文などにまとめていく予定となっている。