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脱メチル化プロモーター融合アクアポリン5遺伝子導入による唾液分泌促進作用

Research Project

Project/Area Number 18791500
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Surgical dentistry
Research InstitutionThe University of Tokushima

Principal Investigator

茂木 勝美  The University of Tokushima, 大学院・ヘルスバイオサイエンス研究部, 助教 (20335805)

Project Period (FY) 2006 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥3,500,000 (Direct Cost: ¥3,500,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
Fiscal Year 2006: ¥2,200,000 (Direct Cost: ¥2,200,000)
Keywords唾液分泌 / アクアポリン5 / 唾液腺 / DNA脱メチル化 / 唾液腺腺房細胞
Research Abstract

アクアポリン(AQP)は細胞膜に存在する膜蛋白質であり、浸透圧勾配の差によって水を輸送する水チャネルとして機能する。AQPは全身のほぼ全ての臓器に存在しており、ヒト唾液腺ではAQP5が唾液分泌に重要な役割を担っている。また、遺伝子のプロモーター領域に存在するCpGアイランドのメチル化は、種々の遺伝子発現を抑制することが示されており、細胞をDNA脱メチル化剤にて処理すると、不活性化されている遺伝子の再活性化につながることが予測されている。本研究においては、不死化ヒト唾液腺導管細胞株(NS-SV-DC)を用いてAQP5の発現誘導とそのメカニズムに関する検討をおこなった。AQP5を発現していないNS-SV-DC細胞をDNA脱メチル化剤(デシタビン;2μM)によって処理するとAQP5の発現が誘導された。また、デシタビン処理によって発現誘導されたAQP5は、NS-SV-DC細胞のnet fluid secretionを増加させたことから、このAQP5は水チャネルとして機能していることが確認された。次に、Bisulfite sequence法によりAQP5遣伝子プロモーター領域内のCpG脱メチル化部位の解析を行った。転写因子結合領域にはSp1結合領域が3か所、AP2結合領域が1か所存在するが、上流より2番目のSp1結合領域にあるCpG(上流から24番目のCpG;24thCpG)と3番目のSp1結合領域近傍にあるCpG(上流から31番目のCpG;31stCpG)が高頻度に脱メチル化されていた。これらCpGの脱メチル化とAQP5プロモーター領域の転写活性との関連をルシフェラーゼアッセイにて解析すると、24thCpGと31stCpGが共に脱メチル化された条件が最も高い転写活性を有していた。したがって、これら2か所のCpGの脱メチル化がAQP5の発現に重要である可能性が考えられた。

Report

(2 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • Research Products

    (7 results)

All 2007 2006

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Cepharanthin-enhanced radiosensitivity through the inhibition of radiation-induced nuclear factor-kappaB activity in human oral squamous cell careinoma cells.2007

    • Author(s)
      Tetsuya Tamatani
    • Journal Title

      International Journal of Oncology 31

      Pages: 761-768

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Cepharanthin, a biscoclaurine alkaloid, prevents destruction of acinar tissues in murine Sjogren's syndrome.2006

    • Author(s)
      AZUMA MASAYUKI
    • Journal Title

      Journal of Rheumatology 33(5)

      Pages: 912-920

    • Related Report
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  • [Journal Article] A novel sandwich assay for quantifying chemo-regulated cell migration within 3-dimensional matrices : wound healing cytokines exhibit distinct motogenic activities compared to the transmembrane assay.2006

    • Author(s)
      Schor SL
    • Journal Title

      Cell Motility and the Cytoskeleton 63(5)

      Pages: 286-300

    • Related Report
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  • [Journal Article] 転写因子NF-κB活性の抑制による口腔扁平上皮癌の放射線感受性の増強2006

    • Author(s)
      茂木 勝美
    • Journal Title

      四国歯学会雑誌 18(2)

      Pages: 179-185

    • NAID

      110006560947

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  • [Presentation] プオテアソーム阻害剤Bortezomibの口腔扁平上皮癌に対する抗踵瘍効果機構の解析2007

    • Author(s)
      玉谷 哲也
    • Organizer
      第52回日本口腔外科会総会
    • Place of Presentation
      名古屋国際会議場
    • Year and Date
      2007-09-29
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    • Author(s)
      Katsumi Motegi
    • Organizer
      AACR(America Association for Cancer Pesearch)2007
    • Place of Presentation
      Loa Angels Convention Center
    • Year and Date
      2007-04-18
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    • Author(s)
      茂木 勝美
    • Organizer
      第61回日本口腔科学会総会
    • Place of Presentation
      神戸国際会議場
    • Year and Date
      2007-04-10
    • Related Report
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Published: 2006-04-01   Modified: 2016-04-21  

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