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歯肉線維芽細胞上に発現するHLAクラスII分子の生理的意義の解明

Research Project

Project/Area Number 18791594
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Periodontal dentistry
Research InstitutionOkayama University

Principal Investigator

畑中 加珠  Okayama University, 大学院・医歯薬学総合研究科, 助教 (50362992)

Project Period (FY) 2006 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥3,000,000 (Direct Cost: ¥3,000,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,500,000 (Direct Cost: ¥1,500,000)
Keywordsシグナル伝達 / 歯肉線維芽細胞 / HLAクラスII分子
Research Abstract

昨年度,歯肉線維芽細胞(GF)におけるHLAクラスII分子(HLA-II)を介した細胞内シグナル伝達物質として,focal adhesion kinase(FAK)の活性化を確認した。そこで本年度は,1)FAKとHLA-IIとの会合形態,2)サイトカイン産生に至るシグナル伝達へのFAKの影響を検討した。
健常人の辺縁歯肉から分離・培養したGFを用い,ヒトIFN-γによって細胞膜上にHLA-IIを発現誘導させた。
1)抗HLA-II抗体(L243)が認識するHLA-IIと会合分子複合体を免疫沈降することによって会合分子を得た。IFN-γ処理と未処理のGFから免疫沈降法によって得た画分をSDS-PAGEで分離した後にWestern blotting法でFAKを検出した。同様に,L243にて免疫沈降した画分からFAKおよびリン酸化FAKを検出した。その結果,FAKは共沈降する分子として検出され,またL243でGFを刺激した際に細胞内FAKのリン酸化が増強した。
2)L243刺激したGFにおけるFAKのリン酸化がFAK阻害剤(luteolin,quercetin)によって影響を受けるかどうかを,Western blotting法で調べた。luteolinはFAKのリン酸化を抑制したが,quercetinは影響を与えなかった。さらに,培養上清中のサイトカインの量をELISA法で測定すると,luteolinは,L243刺激によって誘導されるGFからのIL-6,MCP-およびRANTESの産生を濃度依存的に抑制した。
一般にFAKは,インテグリン(接着分子)の細胞内,ドメインと会合しインテグリンを介してシグナル伝達することが知られている。本研究では,FAKがHLA-IIと直接会合してHLA-IIを介したサイトカイン産生に至るシグナル伝達に関与することが新たに示唆された。

Report

(2 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • Research Products

    (7 results)

All 2007 2006

All Journal Article (4 results) (of which Peer Reviewed: 1 results) Presentation (3 results)

  • [Journal Article] Focal adhesion kinase (FAK) mediates human lekuocyte histocompatibility antigen (HLA) class II-induced signaling in gingival fibroblasts2007

    • Author(s)
      Yoshizawa S., et. al.
    • Journal Title

      J Periodontal Res. 42(6)

      Pages: 572-579

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] FAK mediates HLA-II-induced signaling in gingival fibroblasts2006

    • Author(s)
      Sayuri Yoshizawa et al.
    • Journal Title

      International Association for Dental Research J.Dent.Res.

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] HLA-DR分子を介した刺激によってヒト歯肉線維芽細胞はGRO(growth-related oncogene)を産生する2006

    • Author(s)
      目黒道生 他
    • Journal Title

      日本歯科保存学会誌 49・春季特別号

      Pages: 99-99

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] 歯肉線維芽細胞内のサイトカイン産生に関わるHLA-II分子を介した刺激伝達へのFAKへの関与2006

    • Author(s)
      吉澤さゆり 他
    • Journal Title

      日本歯科保存学会誌 49巻・秋季特別号

      Pages: 129-129

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Presentation] Efficts of HLA-II-induced CXC chemokines from human gingival fibroblasts on the proliferation of HUVEC cells2007

    • Author(s)
      岡本祐佳, 他
    • Organizer
      第37回日本免疫学会総会・学術集会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2007-11-22
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] FAK mediates HLA class II-induced signaling in ginggival fibroblasts2007

    • Author(s)
      目黒道生, 他
    • Organizer
      第37回日本免疫学会総会・学術集会
    • Place of Presentation
      東京
    • Year and Date
      2007-11-22
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] HLA-DR分子を介した刺激によってヒト歯肉線維芽細胞から産生されるCXCケモカインの臍帯静脈内皮細胞の増殖への影響2007

    • Author(s)
      岡本祐佳, 他
    • Organizer
      日本歯科保存学会 2007年春季学術大会(第126回)
    • Place of Presentation
      大宮
    • Year and Date
      2007-06-08
    • Related Report
      2007 Annual Research Report

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Published: 2006-04-01   Modified: 2016-04-21  

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