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ヒト胎盤形成における糖転移酵素GnT-Vの機能と絨毛外栄養膜細胞浸潤機構の解明

Research Project

Project/Area Number 18799005
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (B)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Obstetrics and gynecology
Research InstitutionNagoya University

Principal Investigator

山本 英子  Nagoya University, 医学部・附属病院, 助教 (10432262)

Project Period (FY) 2006 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥3,100,000 (Direct Cost: ¥3,100,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,700,000 (Direct Cost: ¥1,700,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,400,000 (Direct Cost: ¥1,400,000)
Keywords胎盤 / 糖転移酵素 / 絨毛外栄養膜細胞 / GnT-V / α5β1 integrin
Research Abstract

GnT-V発現抑制絨毛外栄養膜細胞(EVT)モデルとして絨毛癌細胞株JarにsiRNAレトロウイルスベクターを遺伝子導入し、機能実験を行った。siGnT-V導入株ではmock株に比べて、MTS assayによる96時間までの増殖能に差は見られなかった。Migration assayおよびmatrigel invasion assayでは遊走細胞は2.1倍に、浸潤細胞は3.4倍に亢進した。
GnT-V発現抑制による浸潤能促進機構を明らかにするために、zymographyによるmatrix metalloproteinase活性の変化を確認したが、MMP-2,MMP-9活性ともに変化は認めなかった。次に、細胞外基質への接着能を検討すると、ラミニン、フィブロネクチン、コラーゲンIおよびIVすべてにおいて接着能は亢進していた。絨毛細胞が浸潤能を持つEVTに分化するときには、膜表面に発現するインテグリンのサブタイプが基質の変化とともに変化し、浸潤に最も重要であるのはα5β1インテグンである。インテグリサブタイプの発現をフローサイトメトリーで確かめると、α1,α5,α6,β1インテグリンすべてに発現変化は認めなかった。しかし、α5β1インテグリンによる免疫沈降後にL_4-PHAを用いたレクチンブロットを行うと、α5β1インテグリンヘのβ1-6GlcNAc鎖付加レベルがGnT-V抑制株において明らかに抑制されていた。免疫沈降後に行ったα5、β1インテグリン抗体を用いたWesternblotでもそれぞれの蛋白発現レベルに変化は認めなかった。
以上より、ヒトEVTにおいてはGnT-Vがα5β1インテグリンにβ1-6-G1cNAc鎖を付加することによって、浸潤を抑制している可能性が示唆された。細胞における分子の機能は、蛋白発現レベルのみでなく糖鎖修飾によってさらに制御されることは、今後の研究においても重要な視点である。

Report

(2 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • Research Products

    (9 results)

All 2008 2007 2006

All Journal Article (8 results) (of which Peer Reviewed: 3 results) Presentation (1 results)

  • [Journal Article] Twist expression in patients with cervical cancer is associated with poor disease outcome2008

    • Author(s)
      Shibata K, et. al.
    • Journal Title

      Annals of Oncology 19

      Pages: 81-85

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Expression of N-acetylglucosaminyltransferase V in endometrial cancer correlates with poor prognosis2007

    • Author(s)
      Yamamoto E, et. al.
    • Journal Title

      British Journal of Cancer 97

      Pages: 1538-1544

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] Genetically identified complete hydatidiform mole coexisting with a live twin fetus: comparison with conventional diagnosis2007

    • Author(s)
      Sumigama S, et al.
    • Journal Title

      Gynecol Obstet Invest 64

      Pages: 228-31

    • Related Report
      2007 Annual Research Report
    • Peer Reviewed
  • [Journal Article] A pure nongestational choriocarcinoma of the ovary diagnosed with short tandem repeat analysis : case report and review of the literature2007

    • Author(s)
      Yamamoto E, et al.
    • Journal Title

      Int J Gynecol Cancer 17

      Pages: 254-258

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Indoleamine 2,3-dioxygenase is a novel prognostic indicator for endometrial cancer2006

    • Author(s)
      Ino K, et al.
    • Journal Title

      Br J Cancer 95

      Pages: 1555-1561

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Endoplasmic reticulum aminopeptidase-1 mediates leukemia inhibitory factor-induced cell surface human leukocyte antigen-G expression in JEG-3 choriocarcinoma cells2006

    • Author(s)
      Shido F, et al.
    • Journal Title

      Endocrinology 147

      Pages: 1780-1788

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Angiotensin II type 1 receptor expression in ovarian cancer and its correlation with tumour angiogenesis and patient survival2006

    • Author(s)
      Ino K, et al.
    • Journal Title

      Br J Cancer 27

      Pages: 552-560

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] 性器不正出血への対応2006

    • Author(s)
      山本英子
    • Journal Title

      産婦人科の実際 55

      Pages: 1993-1997

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Presentation] INVOLVEMENT OF OLIGOSACCHARIDE CHANGES IN α5β1 INTEGRIN IN MIGRATION OF EXTRAVILLOUS TROPHOBLASTS2007

    • Author(s)
      Yamamoto, E et al.
    • Organizer
      International Federation of Placenta Associations
    • Place of Presentation
      Kingston, Canada
    • Year and Date
      2007-08-17
    • Related Report
      2007 Annual Research Report

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Published: 2006-04-01   Modified: 2016-04-21  

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