無顎類および魚類の皮膚における防御機構

• Project/Area Number: 18880025
• Research Category: Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)
• Allocation Type: Single-year Grants
• Research Field: General fisheries
• Research Institution: Kitasato University
• Principal Investigator: 筒井 繁行 Kitasato University, 水産学部, 助教 (20406911)
• Project Period (FY): 2006 – 2008
• Project Status: Completed (Fiscal Year 2007)
• Budget Amount: ¥2,780,000 (Direct Cost: ¥2,780,000); Fiscal Year 2007: ¥1,390,000 (Direct Cost: ¥1,390,000); Fiscal Year 2006: ¥1,390,000 (Direct Cost: ¥1,390,000)
• Keywords: 皮膚 / 生体防御 / 魚類 / 円口類 / サイトカイン / T細胞 / 抗原提示細胞 / 獲得免疫系 / T細胞受容体 / TNF囮受容体

Research Abstract

カワヤツメおよびマアナゴの皮膚から細胞を分離・培養する条件を検討し、0.05%トリプシン溶液を用いて、90%以上の生存細胞を培養する方法を確立した。この方法を用いて、6時間のLPS刺激によって発現量が増加する遺伝子からなるサブトラクションテンプレートを作製した。このテンプレートをPCRで増幅し、定法に従って塩基配列を網羅的に解析した。そのうち免疫関連因子として、昨年度に得られたマアナゴT細胞受容体(TCR)およびTNF囮受容体(TNF Decoy Receptor)およびカワヤツメインターロイキン-17(IL-17)に加え、本年度新たにマアナゴから、抗原提示細胞の重要な膜上分子であるMHCクラスII分子、およびインターロイキン-2の発現を誘導するInterleukin enhancer binding factor 2(ILF-2)の部分配列を得た。このうち、マアナゴTNF囮受容体およびカワヤツメインターロイキン-17についての投稿論文を、国際学術誌に発表している。
マアナゴT細胞受容体については全塩基配列を決定しており、MHCクラスIIおよびILF-2に関してもまもなく全塩基配列を得る予定である。これら獲得免疫系の主要因子であるT細胞受容体、MHCクラスIIおよびILF-2に関しては、20年度の日本比較免疫学会で発表する予定である。

Research Products

• [Journal Article] Isolation of epiderml cells and cDNA cloning of TNF decoy receptor 3 of conger eel, Conger myriaster (2008)
  • Author(s): Tsutsui S, Yoshino Y, Matsui S, Nakamura O, Muramoto K, Watanabe T.
  • Journal Title: Fish and Shellfish Immunology 24 Pages: 366-371
  • Peer Reviewed
• [Journal Article] Lamprey(Letheteron japonicum)IL-17 Upregulated by LPS-Stimulation in the Skin Cells (2007)
  • Author(s): Tsutsui S, Nakamura O, Watanabe T.
  • Journal Title: Immunogenetics 59 Pages: 873-882
  • Peer Reviewed
• [Presentation] ヤツメウナギIL-17 (2007)
  • Author(s): 筒井 繁行・中村 修・渡邉 翼
  • Organizer: 日本比較免疫学会
  • Place of Presentation: 浜松市
  • Year and Date: 2007-08-21