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エナメリンの機能解析

Research Project

Project/Area Number 18890068
Research Category

Grant-in-Aid for Young Scientists (Start-up)

Allocation TypeSingle-year Grants
Research Field Periodontal dentistry
Research InstitutionTokyo Women's Medical University (2007)
Tokyo Medical and Dental University (2006)

Principal Investigator

岩田 隆紀  Tokyo Women's Medical University, 医学部, 助教 (60431946)

Project Period (FY) 2006 – 2007
Project Status Completed (Fiscal Year 2007)
Budget Amount *help
¥2,600,000 (Direct Cost: ¥2,600,000)
Fiscal Year 2007: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
Fiscal Year 2006: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,300,000)
Keywords歯学 / 再生医学 / 細胞外マトリックス / エナメルタンパク / 糖鎖 / 歯周組織再生 / エムドゲイン / シグナル伝達 / 蛋白質
Research Abstract

エナメリンはエナメル形成に必須の細胞外マトリックスタンパクであり、この遺伝子を欠損するとエナメル質形成不全症を引き起こすことがわかっている。また、近年の臨床報告からエナメル由来のマトリックスタンパクが歯周組織再生に有効であることが示されている。そこで本研究ではエナメリンの機能を調べるためにエナメル上皮由来細胞の初代培養とリコンビナントエナメリンの強制発現および分離精製を行いその機能を検索した。
未萌出のブタ第三第臼歯歯胚組織よりエナメル上皮細胞を採取し、上皮細胞専用培地(K-SFM)にて初代培養を行った。同組織よりRNAを抽出しエナメリン貴伝子をクローニングし、発現ベクターに組み込み、ヒト胎児腎臓由来細胞株(HEK293)を用いて強制発現させ、培養上清中からリコンビナントブタエナメリンを分離精製した。その後エナメリンと関連の深い各重細胞(骨芽細胞、セメント芽細胞、エナメル上皮細胞、歯髄細胞)を用いて、リコンビナントエナメリンの細胞接着能を検索した。
リコンビナントエナメリンはSDS-PAGEで160k Daの位置に確認され、N型糖鎖による翻訳後修飾が確認された。リコンビナントエナメリンはエナメル芽細胞の多く含まれるエナメル上皮由来細胞において濃度依存的な細胞接着能を示し、その活性はI型コラーゲンの半分程度であったが、同様に作製されたアメロジェニン・アメロブラスチンではこの細胞接着活性は見られなかった。
以上の結果より、エナメリンはエナメル芽細胞の接着に特異的に関与していることが示唆された。

Report

(2 results)
  • 2007 Annual Research Report
  • 2006 Annual Research Report
  • Research Products

    (9 results)

All 2008 2007 2006

All Journal Article (4 results) Presentation (3 results) Book (2 results)

  • [Journal Article] Processing of ameloblastin by MMP-202007

    • Author(s)
      Iwata T, Yamakoshi Y, Hu JC, Ishikawa I, Bartlett JD, Krebsbach PH, Simmer JP.
    • Journal Title

      Journal of Dental Research 86・2

      Pages: 153-7

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Establishment of porcine pulp-derived cell lines and expression of recombinant dentin sialoprotein and recombinant dentin matrix protein-1.2007

    • Author(s)
      Iwata T, Yamakoshi Y, Simmer JP, Ishikawa I, Hu JC.
    • Journal Title

      European Journal of Oral Science 115・1

      Pages: 48-56

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Dentin sialophosphoprotein is processed by MMP-2 and MMP-20 in vitro and in vivo.2006

    • Author(s)
      Yamakoshi Y, Hu JC, Iwata T, Kobayashi K, Fukae M, Simmer JP.
    • Journal Title

      Journal of Biological Chemistry 281・50

      Pages: 38235-43

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Journal Article] Porcine enamel protein fractions contain transforming growth factor-betal.2006

    • Author(s)
      Nagano T, Oida S, Suzuki S, Iwata T, Yamakoshi Y, Ogata Y, Gomi K, Arai T, Fukae M.
    • Journal Title

      Journal of Periodontology 77・10

      Pages: 1688-1694

    • Related Report
      2006 Annual Research Report
  • [Presentation] 歯根膜シートによる歯周組織再生-ナノゲル量子ドット標識細胞の追跡2008

    • Author(s)
      岩田 隆紀
    • Organizer
      第7回日本再生医療学会総会
    • Place of Presentation
      名古屋国際会議場
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] Production and Bioactivity of Recombinant Enamel Proteins2007

    • Author(s)
      Takanori Iwata
    • Organizer
      The 7th Asian Pacific Society of Periodontology Meeting
    • Place of Presentation
      Beijing, China
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Presentation] Production and Bioactivity of Recombinant Enamel Proteins2007

    • Author(s)
      Takanori Iwata
    • Organizer
      Tissue Engineering International & Regenerative Medicine Society Asia_Pacific Chapter Meeting 2007 (TERMIS-AP, 2007)
    • Place of Presentation
      Tokyo, Japan
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Book] デンタルトリビューン 12月号2007

    • Author(s)
      岩田 隆紀
    • Publisher
      メディカルトリビューン社
    • Related Report
      2007 Annual Research Report
  • [Book] 新歯周治療2006

    • Author(s)
      岩田 隆紀, ほか
    • Total Pages
      176
    • Publisher
      デンタルダイアモンド社
    • Related Report
      2006 Annual Research Report

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Published: 2006-04-01   Modified: 2016-04-21  

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