| Project/Area Number |
18H02915
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| Research Category |
Grant-in-Aid for Scientific Research (B)
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| Allocation Type | Single-year Grants |
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| Section | 一般 |
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| Review Section |
Basic Section 56010:Neurosurgery-related
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| Research Institution | Nara Medical University |
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Principal Investigator |
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| Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) |
中村 光利 奈良県立医科大学, 医学部附属病院, 研究員 (00305715)
中澤 務 奈良県立医科大学, 医学部, 研究員 (00772500)
松田 良介 奈良県立医科大学, 医学部, 学内講師 (60453164)
西村 文彦 奈良県立医科大学, 医学部, 講師 (70433331)
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| Project Period (FY) |
2018-04-01 – 2021-03-31
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| Project Status |
Completed (Fiscal Year 2020)
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| Budget Amount *help |
¥13,260,000 (Direct Cost: ¥10,200,000、Indirect Cost: ¥3,060,000)
Fiscal Year 2020: ¥3,250,000 (Direct Cost: ¥2,500,000、Indirect Cost: ¥750,000)
Fiscal Year 2019: ¥2,340,000 (Direct Cost: ¥1,800,000、Indirect Cost: ¥540,000)
Fiscal Year 2018: ¥7,670,000 (Direct Cost: ¥5,900,000、Indirect Cost: ¥1,770,000)
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| Keywords | 膠芽腫 / iPS / CAR 遺伝子 / Natural killer cell / glioblastoma / EGFRvIII / natural killer 細胞 / natural killer cell / EGFRvIII-CAR / iPS cell / EGFRvIII特異的CAR / iPS由来NK細胞 / 細胞免疫療法 |
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| Outline of Final Research Achievements |
We established human iPSC derived from human peripheral blood T cells by episomal vector mixture expressing six genes (OCT3/4, KLF4, SOX2, L-MYC, LIN28, and dominant negative mouse p53), and transduced the EvCAR gene by lentivirus vector. The EvCAR-iPSC expressed EvCAR and stem cell markers (NANOG, OCT3/4, SSEA4, TRA-1-60). Matrigel-suspended EvCAR-iPSC formed teratoma in NOG mice subcutaneously. Whole-genome analysis revealed that the EvCAR-iPSC harbored T cell receptor recombination and seven non-synonymous heterozygous mutations. The EvCAR transgenes were inserted into the introns of the CLBP, TMEM132D, and PSMF1 genes. Next, we induced EvCAR-NKC via spin embryoid body (EB) culture. The established EvCAR-iPSC were cultured in APEL 2 medium containing SCF, VEGF, BMP4, and Y-27632 in 96-well round-bottom plates for 10 days to form EB. The EBs included 37.5% CD34/CD43-positive hematopoietic stem/progenitor cells.
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| Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements |
研究の成果は、iPSC から EGFRvIII 特異的 CAR 発現 NK を大量に準備することが可能で、off-the-shelf の NK 細胞免疫療法の開発として、難治性悪性腫瘍である膠芽腫に対する有力な新規併用療法の１つとなる可能性があり、創造性に富んだ研究であると考える。CAR 発現 NK (CAR-NK) は CAR-T より安全性が高い可能性がある。不均一で多様性の強い細胞集団である膠芽腫に対して、安全で高い治療効果を期待できる CAR-NK はより有用な抗がん免疫細胞であると考えられる。本研究の成果は、予後不良の膠芽腫に対する新規併用療法になると期待される。
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