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ハムスターをモデルとした哺乳類の「雌」におけるPIWI-piRNAの機能解明

Research Project

Project/Area Number 18J22025
Research Category

Grant-in-Aid for JSPS Fellows

Allocation TypeSingle-year Grants
Section国内
Research Field Laboratory animal science
Research InstitutionKeio University

Principal Investigator

石野 響子  慶應義塾大学, 医学研究科, 特別研究員(DC1)

Project Period (FY) 2018-04-25 – 2021-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2020)
Budget Amount *help
¥2,800,000 (Direct Cost: ¥2,800,000)
Fiscal Year 2020: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2019: ¥900,000 (Direct Cost: ¥900,000)
Fiscal Year 2018: ¥1,000,000 (Direct Cost: ¥1,000,000)
KeywordsRNAサイレンシング / PIWI-piRNA / 哺乳動物 / 生殖細胞 / ハムスター
Outline of Annual Research Achievements

PIWIタンパク質は主に生殖細胞で発現し、小分子RNAの一種であるpiRNA(PIWI-interacting RNA)と複合体を形成することでRNAサイレンシングを介したトランスポゾンの発現抑制に寄与する。哺乳類のモデル生物であるマウスはオスのみでPiwi遺伝子ファミリーが発現しており、これらの遺伝子欠損マウスはいずれも精子形成不全により不妊の表現型を示すが、メスは健常である。近年、マウスを除くほぼ全ての哺乳動物はメスにおいてもPiwiが発現している。一方卵細胞におけるPIWI-piRNA複合体の機能は不明である。そこで本研究では、卵細胞でPiwiを発現するゴールデンハムスター(Mesocricetus auratus)を実験モデルとして、メスにおけるPIWIとpiRNAの解析をおこなった。
まずハムスターにおけるPiwiファミリーの発現をトランスクリプトーム解析とPCRにより検証した。結果、卵細胞ではPiwil1およびPiwil3の発現が強くみられたため、この2種を研究対象とした。次に各PIWIタンパク質を特異的に認識するマウスモノクローナル抗体を作製し、免疫沈降法によりそれらに結合するpiRNA群を卵巣、未受精卵(MII oocyte)および2細胞期胚から単離した。その結果、PIWIL1では卵成熟過程を経るにつれ結合するpiRNA群の塩基長が短くなることを新たに見出した。一方PIWIL3においては、MII oocyteでのみ19塩基長前後のpiRNAが結合していること、さらにその結合にはリン酸化修飾が必要であることを明らかにした。
本研究によって得られた知見は、ハムスターの卵細胞におけるpiRNAの特徴を明らかにし、新たに得られたゲノム情報と合わせることで、哺乳動物の卵細胞におけるpiRNA研究の有用なモデル基盤となることが期待される。

Research Progress Status

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

Strategy for Future Research Activity

令和2年度が最終年度であるため、記入しない。

Report

(3 results)
  • 2020 Annual Research Report
  • 2019 Annual Research Report
  • 2018 Annual Research Report
  • Research Products

    (9 results)

All 2021 2019 2018

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (8 results)

  • [Journal Article] Hamster PIWI proteins bind to piRNAs with stage-specific size variations during oocyte maturation2021

    • Author(s)
      Ishino Kyoko、Hasuwa Hidetoshi、Yoshimura Jun、Iwasaki Yuka W、Nishihara Hidenori、Seki Naomi M、Hirano Takamasa、Tsuchiya Marie、Ishizaki Hinako、Masuda Harumi、Kuramoto Tae、Saito Kuniaki、Sakakibara Yasubumi、Toyoda Atsushi、Itoh Takehiko、Siomi Mikiko C、Morishita Shinichi、Siomi Haruhiko
    • Journal Title

      Nucleic Acids Research

      Volume: 49 Issue: 5 Pages: 2700-2720

    • DOI

      10.1093/nar/gkab059

    • Related Report
      2020 Annual Research Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] ゴールデンハムスターの雌性生殖細胞におけるPIWI-piRNAの機能解明2019

    • Author(s)
      石野響子、蓮輪英毅、塩見春彦
    • Organizer
      第21回日本RNA学会
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] 哺乳動物の雌性生殖細胞特異的なRNAサイレンシング機構の解明に向けて2019

    • Author(s)
      石野響子、蓮輪英毅、塩見春彦
    • Organizer
      RNAフロンティアミーティング2019
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] ゴールデンハムスターの雌性生殖細胞におけるPIWI-piRNAの配列解析2019

    • Author(s)
      石野響子、蓮輪英毅、塩見春彦
    • Organizer
      生命情報科学若手の会第11回研究会
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] ゴールデンハムスターにおける卵細胞特異的なPIWIとpiRNAの発見2019

    • Author(s)
      石野響子、蓮輪英毅、塩見春彦
    • Organizer
      第42回日本分子生物学会年会
    • Related Report
      2019 Annual Research Report
  • [Presentation] Analysis of PIWI-piRNA pathway in female hamster2019

    • Author(s)
      ◯石野響子,蓮輪英毅,塩見春彦
    • Organizer
      第20回武田科学振興財団生命科学シンポジウム
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] ハムスターにおけるPIWI-piRNAの機能解析2018

    • Author(s)
      ◯石野響子,蓮輪英毅,塩見春彦
    • Organizer
      生命科学系フロンティアミーティング2018
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] ハムスターをモデルとした哺乳類の雌性生殖細胞におけるPIWI-piRNAの機能解析2018

    • Author(s)
      ◯石野響子,蓮輪英毅,塩見春彦
    • Organizer
      RNAフロンティアミーティング2018
    • Related Report
      2018 Annual Research Report
  • [Presentation] ハムスターをモデルとした哺乳類の「雌」におけるPIWI-piRNAの機能解析2018

    • Author(s)
      ◯石野響子,蓮輪英毅,塩見春彦
    • Organizer
      第20回日本RNA学会
    • Related Report
      2018 Annual Research Report

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Published: 2018-05-01   Modified: 2024-03-26  

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