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Applicaton of enzyme-labled antigen method for formalin-fixed paraffin-embedded tissue section

Research Project

Project/Area Number 18K07030
Research Category

Grant-in-Aid for Scientific Research (C)

Allocation TypeMulti-year Fund
Section一般
Review Section Basic Section 49020:Human pathology-related
Research InstitutionFujita Health University

Principal Investigator

Mizutani Yasuyoshi  藤田医科大学, 医学部, 助教 (10546229)

Co-Investigator(Kenkyū-buntansha) 塩竈 和也  藤田医科大学, 医療科学部, 講師 (10387699)
稲田 健一  藤田医科大学, 医学部, 教授 (70246081)
鈴木 元  藤田医科大学, 医学部, 教授 (80236017)
Project Period (FY) 2018-04-01 – 2022-03-31
Project Status Completed (Fiscal Year 2021)
Budget Amount *help
¥4,420,000 (Direct Cost: ¥3,400,000、Indirect Cost: ¥1,020,000)
Fiscal Year 2020: ¥1,170,000 (Direct Cost: ¥900,000、Indirect Cost: ¥270,000)
Fiscal Year 2019: ¥1,690,000 (Direct Cost: ¥1,300,000、Indirect Cost: ¥390,000)
Fiscal Year 2018: ¥1,560,000 (Direct Cost: ¥1,200,000、Indirect Cost: ¥360,000)
Keywords酵素抗原法 / 形質細胞 / 抗体 / 抗原 / 疾患特異的抗体 / 抗体産生細胞 / パラフィン切片 / 免疫 / 慢性炎症 / 感染症 / がん / パラフィン包埋切片 / 固定
Outline of Final Research Achievements

In this study, we attempted to apply the enzyme-labeled antigen method to formalin-fixed paraffin-embedded (FFPE) tissue sections. We evaluated retrieval methods for the activity of antibodies on FFPE sections. High-concentration proteinase K treatment resulted in only around 50% retrieval of activity in FFPE sections compared to PFA-fixed frozen sections, but around 80% in PFA-fixed paraffin-embedded sections. We also evaluated whether various fixation methods can maintain antibody activity in paraffin sections. It was found that some fixation methods could maintain antibody activity on paraffin sections regardless of the type of target antigens. Signal amplification methods were also tested and their effectiveness was confirmed.

Academic Significance and Societal Importance of the Research Achievements

複数種の固定法について検討を行い、パラフィン切片で抗体活性を維持可能な固定法が明らかとなった。これは、今後の検体の保管管理の簡便化につながる知見であり、酵素抗原法の応用性を高める知見である。また、FFPE切片における抗原の賦活化法や抗原抗体反応のシグナル増感法、あるいは抗原の標識分子に関する有用性を明らかにすることができた。これらの手法を改良して組み合わせることで、酵素抗原法のFFPE切片への応用が可能となることが期待される。

Report

(5 results)
  • 2021 Annual Research Report   Final Research Report ( PDF )
  • 2020 Research-status Report
  • 2019 Research-status Report
  • 2018 Research-status Report
  • Research Products

    (7 results)

All 2021 2020 2019 2018

All Journal Article (1 results) (of which Peer Reviewed: 1 results,  Open Access: 1 results) Presentation (6 results)

  • [Journal Article] CEBPγ facilitates lamellipodia formation and cancer cell migration through CERS6 upregulation2021

    • Author(s)
      Hanxiao Sh, Atsuko Niimi, Toshiyuki Takeuchi, Kazuya Shiogama, Yasuyoshi Mizutani, Taisuke Kajino, Kenichi Inada, Tetsunari Hase, Takahiro Hatta, Hirofumi Shibata, Takayuki Fukui, Toyofumi Fengshi Chen-Yoshikawa, Kazuki Nagano, Takashi Murate, Yoshiyuki Kawamoto, Shuta Tomida, Takashi Takahashi, Motoshi Suzuki
    • Journal Title

      Cancer Science

      Volume: 未定 Issue: 7 Pages: 2770-2780

    • DOI

      10.1111/cas.14928

    • Related Report
      2020 Research-status Report
    • Peer Reviewed / Open Access
  • [Presentation] AGIAタグ蛋白抗原プローブを用いた酵素抗原法の応用2020

    • Author(s)
      水谷泰嘉
    • Organizer
      第109回日本病理学会総会
    • Related Report
      2020 Research-status Report
  • [Presentation] 病変組織内の特異的抗体産生細胞を可視化する「酵素抗原法」の技術開発2019

    • Author(s)
      水谷泰嘉、塩竈和也、竹内俊幸、新美敦子、石 含笑、稲田健一、鈴木 元
    • Organizer
      第60回日本組織細胞化学会総会・学術集会
    • Related Report
      2019 Research-status Report
  • [Presentation] 酵素抗原法によるピロリ菌感染スナネズミにおける抗ピロリ菌抗体産生細胞の局在証明2019

    • Author(s)
      水谷泰嘉、塩竈和也、竹内俊幸、新美敦子、石 含笑、稲田健一、鈴木 元
    • Organizer
      第108回日本病理学会総会
    • Related Report
      2019 Research-status Report
  • [Presentation] 酵素抗原法の技術開発:標本作製過程が抗体活性におよぼす影響2018

    • Author(s)
      水谷泰嘉、塩竈和也、竹内俊幸、新美敦子、稲田健一、鈴木元
    • Organizer
      第59回日本組織細胞化学会総会・学術集会
    • Related Report
      2018 Research-status Report
  • [Presentation] 酵素抗原法の技術開発:パラフィン包埋切片において各種固定法が抗体活性におよぼす影響2018

    • Author(s)
      水谷泰嘉、塩竈和也、尾之内高慶、櫻井浩平、稲田健一、堤 寬
    • Organizer
      第107会日本病理学会総会
    • Related Report
      2018 Research-status Report
  • [Presentation] 酵素抗原法の技術開発:固定条件が抗体活性におよぼす影響2018

    • Author(s)
      水谷泰嘉、塩竈和也、竹内俊幸、新美敦子、稲田健一、鈴木元
    • Organizer
      第50回藤田学園医学会
    • Related Report
      2018 Research-status Report

URL: 

Published: 2018-04-23   Modified: 2023-01-30  

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