脂肪組織由来幹細胞とスタチン製剤を用いた間質性肺炎マウスに対する治療効果の検討

Research Project

Project/Area Number	18K08160
Research Category	Grant-in-Aid for Scientific Research (C)
Allocation Type	Multi-year Fund
Section	一般
Review Section	Basic Section 53030:Respiratory medicine-related
Research Institution	Osaka Medical College
Principal Investigator	小谷卓矢大阪医科大学, 医学部, 講師 (80411362)
Co-Investigator(Kenkyū-buntansha)	伊井正明大阪医科大学, 研究支援センター, 講師 (10442922) 朝井章大阪医科大学, 医学部, 准教授 (30622146)
Project Period (FY)	2018-04-01 – 2020-03-31
Project Status	Discontinued (Fiscal Year 2019)
Budget Amount *help	¥4,030,000 (Direct Cost: ¥3,100,000、Indirect Cost: ¥930,000) Fiscal Year 2020: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000) Fiscal Year 2019: ¥1,300,000 (Direct Cost: ¥1,000,000、Indirect Cost: ¥300,000) Fiscal Year 2018: ¥1,430,000 (Direct Cost: ¥1,100,000、Indirect Cost: ¥330,000)
Keywords	間質性肺炎 / 脂肪組織由来間葉系幹細胞 / 脂肪幹細胞 / スタチン
Outline of Annual Research Achievements	B6マウス皮下脂肪から分離した脂肪組織由来間葉系幹細胞（AdSCs)をブレオマイシンで誘発した間質性肺炎(ILD)マウスモデルに経静脈的に投与しその効果を検討した。13週齢のB6雌マウスの後背部皮下にブレオマイシンを30 μg/μLの濃度で100μL浸透圧ポンプを用いて1週間持続皮下注入し、4週間飼育することによりILDモデルマウスを作成した。実験群は、正常マウス群、疾患群（PBS投与群：コントロール）、AdSCs投与群を設定した。その結果、AdSCs投与群は疾患コントロール群と比較して細胞数依存性に有意に肺の炎症と線維化を抑制した。この研究により、ILDモデルマウスの肺病変に有効な最小AdSCsの細胞数を決定した。次に、シンバスタチンPLGAナノ粒子をAdSCsに抱合してその細胞機能を評価した。シンバスタチンPLGAナノ粒子は、50 μg/50000 cellsの濃度においてAdSCsの遊走能、生存能を促進し、AdSCsが合成する抗炎症と抗線維化に働く因子の遺伝子合成を促進した。シンバスタチンPLGAナノ粒子抱合AdSCs (SimNP-AdSCs)の治療効果を確認するin vivoの実験を行った。治療群は、1. SimNP-AdSCs投与群, 2. AdSCs投与群, 3. 疾患群（コントトール）。SimNP-AdSCs投与群は、細胞単独投与群と比較して、ILDモデルマウスの肺の炎症と線維化を抑制する傾向が得られた。以上の結果は、2019年度の日本再生医療学会総会、ヨーロッパリウマチ学会で発表した。今後は、マウス数を増やして実験を行い、有効性を更に確認する予定であったが、補助事業を廃止することになったため実施にいたらなかった。